| Project/Area Number |
12771403
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Biological pharmacy
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
熊谷 孝則 広島大学, 医学部, 助手 (70274058)
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| Project Period (FY) |
2000 – 2001
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2001)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | ブレオマイシン / Differential Display / 肺線維症 / Transforming growth factor / RT-PCR / Transforming growth factor β |
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| Research Abstract |
ブレオマイシン(Bm)は、扁平上皮癌や精巣癌などの治療に著効を不す抗癌抗生物質である。しかしながら、副作用として重篤な肺線維症を引き起こすことから、その使用には常に制限が伴う。本研究では、ヒト肺正常線維芽細胞(WI-38)において、Bmを添加した際に誘導発現する遺伝子をFluorescence Differential Display(FDD)法を用いて解析し、Bm肺線維症の分子機構を明らかにすることを目的とした。
本研究期間においては、Cy5標識oligo dTプライマー(2種類)および50種類のランダムプライマーを用いてFDD法を行い、Bmにより誘導発現する遺伝子を数十クローン得た。それらの中には、transforming growth factorβ(TGF-β)スーパーファミリーに属すると考えられる遺伝子の一部(3'末端側)が含まれていた。本遺伝子の発現がBmにより誘導されるという報告はこれまでになされていない。RT-PCRを用いた転写解析を行った結果、本遺伝子はBm添加3時間後から誘導発現し、その後少なくとも48時間は高レベルでの発現が持続することが明らかになった。TGF-βは腎・肝などにおける線維症に深く関与していることが知られており、今回取得した遺伝子がBm肺線維症において如何なる役割を果たしているか非常に興味深い。本遺伝子のBm肺線維症における役割を明らかにするためには、その全長型cDNAが必要であることから、5'RACE法を用いて全長型cDNAのクローニングを試みたが、本研究期間内で取得するまでには至らなかった。今後、本遺伝子の全長型cDNAを取得し、その機能を明らかにしたいと考えている。
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