哺乳動物における有機スズ化合物の内分泌攪乱作用機構の解明

• Project/Area Number: 12771445
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Environmental pharmacy
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 四條 裕香子 北里大, 薬学部, 助手 (80306654)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000); Fiscal Year 2001: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2000: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: アンドロゲンレセプター / トリブチルスズ / トリフェニルスズ / 前立腺癌細胞

Research Abstract

トリブチルスズ(TBT)がヒト前立腺癌由来のLNCaP細胞の増殖をアンドロゲン非存在下で促進させること、及びアンドロゲンレセプター(AR)-アンドロゲン応答配列(ARE)を介した転写を活性化することをこれまでに見出した。本研究は、上記の細胞を用いた実験系によりTBTの作用点を解明することを目的としており、本年度はまずはじめに、TBTがARの発現に影響を与えるかどうかを検討した。TBTで処理したLNCaP細胞からmRNAを調製してノーザンブロッティングを行い、AR mRNAの発現量の変化を検討したところ、AR mRNAレベルに変化は認められなかった。また、ARタンパク質の発現量についても、ARに対する抗体を用いてウェスタンブロッティングを行い検討を行ったが、mRNA量の場合と同様に変化は認められず、TBTは細胞内でのARの発現量を変化させないことが明らかになった。次に、内在性ARが発現していないことが分かっているヒト前立腺癌由来のPC3とDU145細胞にAR発現プラスミドを強制発現させた後、AREを介した転写に対するTBTの作用を検討した。その結果、LNCaP細胞にARを強制発現させた場合には、TBTの濃度依存的にARを介した転写が活性化された。またその時ジヒドロテストステロン(DHT)を共存させると、TBTはDHTによる転写の活性化をさらに増大させた。それに対しPC3やDU145細胞においてはTBT単独処理によるARの転写活性化、及びDHTとの併用による転写活性化の増強作用は観察されなかった。従って、TBTによるARを介した転写の活性化及び細胞増殖の促進はLNCaP細胞に特異的な現象であることが明らかになり、本検討によりLNCaP細胞にはTBTが標的とする細胞特異的因子が存在する可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] Yukako Yamabe: "Enhancement of androgen-dependent transcription and cell proliferation by tributyltin and triphenyltin in human prostate cancer cells."Toxicology and Applied Pharmacology. 169. 177-184 (2000)