| Project/Area Number |
12876012
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
蚕糸・昆虫利用学
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| Research Institution | Saga University |
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Principal Investigator |
藤條 純夫 佐賀大学, 農学部, 教授 (50011911)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉賀 豊司 佐賀大学, 農学部, 助手 (00312231)
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| Project Period (FY) |
2000 – 2002
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2002)
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| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2002: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2001: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
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| Keywords | 翅型 / 体色 / 遺伝子 / 寿命 / トビイロウンカ / 蛍光ディファレンシャルディスプレイ / cDNA / 蛍光デファレンシャルヂスプレイ / トランスポゾン / 選抜系統 / デイファレンシアル・デイスプレイ |
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| Research Abstract |
本研究室ではトビイロウンカの翅型・体色発現性について純系とみなされる選抜系統、すなわち黄褐色短翅型、黄褐色長翅型、黒色短翅型、黒色長翅型系統を維持しており、それらは幼虫期間や寿命などの生活史特性にも明らかな相違を示す。本研究では、それらを用いて、翅型・体色の形質発現に関与する遺伝子の探索を試みてきた。前年度のまでの研究で、各選抜系統の4齢1日目及び5齢0日目の個体からmRNAを抽出し、DNase処理後、cDNAを合成し、22種の任意のプライマーと4種の蛍光標識したoligo dTプライマーを用い、このcDNAをテンプレートとして蛍光ディファレンシャルディスプレイを行った。その結果、翅型・体色発現に特異的なクローンを20個検出できた。これらのクローンのうちRT-PCRによってmRNAの発現量に翅型・体色間で差が確認されたプライマーの組み合わせは3つであった。
今年度、この3つのクローンについてホモロジー検索を行ったところ類似性を示すものが得られなかったため、RACEによってより長いDNA断片を得ることを試みた。また、再度RT-PCRによって系統間での発現量の差を調べたところ、新たに調整したRNAを用いた場合にはこれらの遺伝子発現には系統間差異は認められなかった。
現在、昆虫のサンプリングを更に厳密に行い、これらの遺伝子発現の違いについて再現性を確認している。この3年間の研究で、他にも幾つかのクローンが得られており、さらに同様な方法による検索を続けることにより、目的とする遺伝子の同定には多くの時間を要しないと期待される。
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