生体顕微鏡を用いた肺微小循環の可視化解析に関する研究

Research Project

Project/Area Number	12877243
Research Category	Grant-in-Aid for Exploratory Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Anesthesiology/Resuscitation studies
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	杉本壽大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90127241)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鍬方安行大阪大学, 医学系研究科, 助手 (50273678) 田中裕大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (90252676) 嶋津岳士 (嶋津岳志) 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (50196474) 精山明敏大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70206605) 小倉裕司大阪大学, 医学系研究科, 教授 (70301265) 速方俊昭大阪大学, 医学系研究科, 助手 (10322182)
Project Period (FY)	2000 – 2002
Project Status	Completed (Fiscal Year 2002)
Budget Amount *help	¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000) Fiscal Year 2002: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000) Fiscal Year 2001: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000) Fiscal Year 2000: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords	微小循環 / 生体顕微鏡 / 肺障害 / 粘着白血球 / 好中球エラスターゼ / 白血球 / 急性肺傷害 / 脂肪塞栓 / LPS / 白血球機能 / NF-κB
Research Abstract	我々はラットにLPSを経静脈的投与することにより、肺傷害モデルを作成し、生体顕微鏡を用いてリアルタイムに肺微小循環動態を観察する方法を開発した。この方法により、生体顕微鏡下にスペクトロフォトメーターを用いて赤血球速度・ヘモグロビン酸素飽和度が測定でき、レーザードップラー血流計を用いて組織赤血球数、赤血球速度、及び組織血流量が測定可能である。また白血球をローダミンによってラベルし、CCD高感度カメラを用いて肺内白血球動態の観察が可能となった。 LPS投与群ではControl群と比較して、赤血球速度・ヘモグロビン酸素飽和度が投与後60分で有意に低下し、肺微小血管に粘着する白血球数は有意に増加した。この反応は人工呼吸器によるPEEPを0mmHgから3mmHgにすることによって改善効果が認められた。またLPS投与直前にelastase阻害剤を投与すると、LPSで惹起されるこれら一連の反応が有意に抑制されることが明らかになった。従って、LPS誘発肺傷害の発症機序において、粘着白血球の関与が強く示唆され、中でも好中球エラスターゼが肺傷害の発症に強く関与していることが示唆された。今後この一連の肺傷害発症機序を明らかにするため、さらに動物数を増やすとともに、サイトカイン抑制剤、ラジカルスカベンジャーなどの投与効果を検証する予定である。