マダニ唾液腺分子の機能解明と病原体伝播に果たす役割

• Project/Area Number: 12F02217
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 外国
• Research Field: Applied veterinary science
• Research Institution: National Agriculture and Food Research Organization
• Principal Investigator: 辻 尚利 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究所動物疾病対策センター生物学的製剤製造グループ, グループ長
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): ANISUZZAMAN 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究所動物疾病対策センター生物学的製剤製造グループ, 外国人特別研究員 ; ANISUZZAMAN 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究所・細菌・寄生虫研究領域, 外国人特別研究員 ; ANISUZZAMAN 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究所・細菌・寄生虫研究領域, 外国人特別研究員
• Project Period (FY): 2012 – 2014
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2014)
• Budget Amount: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000); Fiscal Year 2014: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000); Fiscal Year 2013: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000); Fiscal Year 2012: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
• Keywords: マダニ / 唾液腺 / ロンギスタチン

Outline of Annual Research Achievements

マダニには個体レベルで展開される宿主体表への付着・血液消化・飽血などの吸血行動を支える器官として、唾液腺や中腸が重要な役割を果たしている。本研究では、シベリアから豪州にかけて広く分布し、ヒト・動物の致死的病原体を伝播する国内最優占種マダニのフタトゲチマダニを用いて、唾液腺で産生される蛋白分解酵素とそのインヒビターに焦点をあて、これら生物活性分子(TBM)の機能解明を通して得られるマダニ特有の機能・構造に立脚した抗マダニ薬及びバベシア症ワクチンなど、マダニの寄生とバベシア症に対する制圧技術を開発する。最終年度は、in vitroの性状解明に成功している終末糖化産物受容体(RAGE)結合分子であるロンギスタチンのin vivo性状についてRAGEノックアウトマウス(RAGE KO)を用いて解析した。ロンギスタチンKdマダニ(dsロンギスタチン)の刺咬部位では、陰性対照であるマダニ(dsmalE、ロンギスタチンは正常に発現している)と比較して、寄生虫感染に特有の細胞集簇である好酸球及びマクロファージの浸潤が確認された。同時に、これらのマウス皮下におけるサイトカインを測定すると、dsma1EではI15, Tnfa, Cox2, 及びMcp5の発現、蛋白レベルの産生が低値であったのに対し、dsロンギスタチンではいずれの産生も有意に高値であった。次に、野生型(Wt)及びRAGE KO にdsma1E、またはdsロンギスタチンを吸血させたところ、Wt-dsロンギスタチンの組合せでは、Wt-dsma1Eと比べて皮下に顕著な好酸球浸潤が確認されたが、RAGE KO-dsロンギスタチンとRAGE KO-dsma1Eの場合、いずれも皮下細胞数に有意な差は認められなかった。以上の成績から内在性ロンギスタチンは、吸血部位においてRAGE介在性炎症反応を減弱しているものと考えられた。

Research Progress Status

本研究課題は平成26年度が最終年度のため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

本研究課題は平成26年度が最終年度のため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Longistatin in tick saliva blocks advanced glycation end-product receptor activation (2014)
  • Author(s): Anisuzzaman, Hatta T, Miyoshi T, Matsubayashi M, Islam MK, Alim MA, Anas MA, Hasan MM, Matsumoto Y, Yamamoto Y, Yamamoto H, Fujisaki K, Tsuji N
  • Journal Title: Journal of Clinical Investigation Volume: 124 Issue: 10 Pages: 4429-4444
  • DOI: 10.1172/jci74917
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Longistatin, an EF-Hand Ca(^<2+>)-Binding Protein from Vector Tick : Identification, Purification, and Characterization. (2013)
  • Author(s): Anisuzzaman, Islam MK, Alim MA, Tsuji N
  • Journal Title: Methods in Molecular Biology Volume: 963 Pages: 127-146
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ロンギスタチンのRAGE吸着を介した宿主炎症反心の抑制 (2014)
  • Author(s): アニスザマン, 三好 猛晴, 八田 岳士, 松林 誠, イスラム カイルル, アリム アブドゥル, 藤崎 幸蔵, 辻 尚利
  • Organizer: 第83回日本寄生虫学会
  • Place of Presentation: 愛媛大学城北キャンパス(愛媛県松山市)
  • Year and Date: 2014-03-28
• [Presentation] Anisuzzaman, 三好 猛晴, 八田 岳士, 松林 誠, Khyrul Islam, Abdul Alim, 藤崎 幸蔵, 辻 尚利 (2013)
  • Author(s): Anisuzzaman, 三好 猛晴, 八田 岳士, 松林 誠, Khyrul Islam, Abdul Alim, 藤崎 幸蔵, 辻 尚利
  • Organizer: 第11回分子寄生虫・マラリアフォーラム
  • Place of Presentation: 長崎大学熱帯医学研究所(長崎県長崎市)
  • Year and Date: 2013-10-03
• [Presentation] Longistatin an antagonist to RAGE, a multiligand receptor, and modulates inflammation during tick's feeding (2013)
  • Author(s): Anisuzzaman, 三好 猛晴, 八田 岳士, 松林 誠, Khyrul Islam, Abdul Alim, 藤崎 幸蔵, 辻 尚利
  • Organizer: 第156回日本獣医学会学術集会
  • Place of Presentation: 岐阜大学キャンパス(岐阜県岐阜市)
  • Year and Date: 2013-09-20
• [Presentation] マダニロンギスタチンのRAGE吸着を介した宿主炎症反応の抑制 (2013)
  • Author(s): アニスザマン、三好猛睛、八田岳士、松林誠、アリムアブドウル、イスラムカイルル、藤崎幸蔵、辻尚利
  • Organizer: 第82回日本寄生虫学会
  • Place of Presentation: 東京医科歯科大学湯島キャンパス
  • Year and Date: 2013-03-30
• [Presentation] Longistatin, a plasminogen activator from the tick Haemaphysalis longicornis, binds with RAGE and induces protective immunity (2012)
  • Author(s): アニスザマン、アリムアブドウル、イスラムカイルル、三好猛晴、八田岳士、松林誠、藤崎幸蔵、辻尚利
  • Organizer: 第154回日本獣医学会学術集会
  • Place of Presentation: 岩手大学農学部
  • Year and Date: 2012-09-16
• [Remarks]
  • URL: http://www.naro.affrc.go.jp/niah/
• [Remarks]
  • URL: http://www.naro.affrc.go.jp/niah/