致死活性を有する新奇表皮剥脱毒素の作用機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	13226080
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Hiroshima University
Principal Investigator	菅井基行広島大学, 歯学部, 教授 (10201568)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小原勝広島大学, 歯学部, 助手 (80253095) 藤原環広島大学, 歯学部, 助手 (90274092) 小松澤均広島大学, 歯学部, 助教授 (90253088)
Project Period (FY)	2001
Project Status	Completed (Fiscal Year 2001)
Keywords	exfoliative toxin / desmoglein / EDIN-B
Research Abstract	Staphylococcus aureus TY114株よりetd pathogenicity island全体のクローニングに成功した。Island全長は9.054-kbとpathogenicity islandとしては小さく、その両側に繰り返し配列AATTCが認められた。既に明らかにされているS.aureus N315株、Mu50株ゲノム塩基配列との比較から、etd pathogenicity islandの染色体上挿入位置を決定した。etd pathogenicity islandには全部で7つのorfがコードされており、病原性に関与する可能性のある遺伝子としてetd, edin-B, putative serine protease geneが、ファージ耐性に関与する遺伝子が1つ、さらにtype IC restriction modificationに関与するhsdS, hsdR, homologue、IS256が存在した。黄色ブドウ球菌、大腸菌で作成したリコンビナントETDは新生児マウス皮内投与により水疱を形成した。大腸菌で作成したリコンビナントETDを作用させたマウス皮膚を用いてdesmoglein1の染色性が低下することを明らかにした。さらにリコンビナントETDがin vitroで昆虫細胞で発現させたヒト、マウスdesmoglein1を選択的に消化することを明らかにした。 etd陽性と判定された広島で分離された株2株、大阪で分離された株1株、ドイツで分離された株15株についてパルスフィールド電気泳動を行った結果、これらの株が同一のクラスターに属することが示唆された。また種々の毒素遺伝子特異的プローブを用いたSouthern blot分析の結果、これらの株の内9株がSECあるいはSEB遺伝子陽性であることが明かとなった。