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ラビリンチュラ類微生物における新規DHA生合成機構の解明

Research Project

Project/Area Number 13760072
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 応用微生物学・応用生物化学
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

秋 庸裕  広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (80284165)

Project Period (FY) 2001 – 2002
Project Status Completed (Fiscal Year 2002)
Budget Amount *help
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2002: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywordsドコサヘキサエン酸 / 不飽和化酵素 / ラビリンチュラ / ポリケチド / 脂肪酸合成酵素 / 高度不飽和脂肪酸
Research Abstract

DHA生産性海洋微生物ラビリンチュラ類の新規単離株を材料として,DHA生合成に関わる酵素群の遺伝子を探索した。真核生物に共通するDHAなど高度不飽和脂肪酸の生合成においては,脂肪酸不飽和化酵素が重要である。その特徴的な構造として3つのヒスチジンクラスターが存在するので,その配列をもとにしてオリゴプラィマーを設計して単離株cDNAライブラリーを鋳型としたPCRを行ったところ,オレイン酸をリノール酸に変換するΔ12不飽和化酵素及びリノール酸をγ-リノレン酸に変換するΔ6不飽和化酵素にそれぞれ対応すると思われる遺伝子断片が得られた。さらにドコサペンタエン酸をDHAに変換するΔ4不飽和化酵素をコードすると考えられる遺伝子断片も得られており,5'-RACE法などによって全長遺伝子を取得しているところである。一方,ラビリンチュラにおいて遺伝子導入や機能解析を行っていく上で,形質転換系の開発が不可欠である。そこで,相同組換え的に遺伝子を導入するための多コピー遺伝子として18S rRNA遺伝子を単離し,塩基配列を決定した。また,外来遺伝子発現用のプロモーター・ターミネーターを同遺伝子から取得するために,inverse PCRによる単離を試みているところである。

Report

(2 results)
  • 2002 Annual Research Report
  • 2001 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All Other

All Publications (10 results)

  • [Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Enzymatic preparation of glycerides rich in docosahexaenoic acid from thraustochytrid single cell oils by Candida rugosa lipase"J. Oleo Sci.. 51. 447-455 (2002)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Tanaka, T.Aki, et al.: "Purification and characterization of a novel fungal α-glucosidase from Mortierella alliacea with high starch-hydrolytic activity"Biosci. Biotech. Biochem.. 66. 2415-2423 (2002)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Grouping newly isolated docosahexaenoic acid-producing thraustochytrids based on the polyunsaturated fatty acid profiles and comparative analysis of 18S rRNA genes"Mar. Biotech.. (in press). (2003)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] T.Aki, K.Hachida, et al.: "Thraustochytrid as a potential source of carotenoids"J. Am. Oil Chem. Soc.. (in press). (2003)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] K.Inagaki, T.Aki, et al.: "Evidences of isozymes for Δ6 fatty acid desaturase in rat hepatocyte"Biosci. Biotech. Biochem.. (in press). (2003)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Michinaka, T.Aki, et al.: "Differential response of two Δ6 fatty acid desaturases from Mucor circinelloides to low temperature"Appl. Microbiol. Biotechnol. (in press). (2003)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] 日本油化学会編(分担執筆): "油化学便覧"丸善. 686 (2001)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Profile of polyunsaturated fatty acids produced by Thraustochytrium sp. KK17-3"J. Am. Oil Chem. Soc.. 78. 605-610 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] T.Aki, Y.Nagahata, et al.: "Production of arachidonic acid by filamentous fungus, Mortierella alliacea strain YN-15"J. Am. Oil Chem. Soc.. 78. 599-604 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] K.Inagaki, T.Aki, et al.: "Identification and expression of a rat fatty acid elongase involved in the biosynthesis of C18 fatty acids"Biosci. Biotech. Biochem.. 66. 613-621 (2002)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report

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Published: 2001-04-01   Modified: 2016-04-21  

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