| Project/Area Number |
13770672
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
General surgery
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
前田 真悟 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80317156)
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| Project Period (FY) |
2001 – 2002
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2002)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
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| Keywords | DNA methylation / 抗癌剤感受性 / antisense oligonulcleotide / 胃癌細胞株 / 5-FU / CDDP / methylation / 抗癌剤耐性 |
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| Research Abstract |
近年、DNA methylationと遺伝子の発現制御との関連が注目され、HDRなどの抗癌剤感受性因子との関連も報告されてきた。われわれは、DNA methyltransferaseに対するantisense oligonucleotideを作成し、DNA methylationが及ぼす5-FU及びCDDPへの感受性変化を検討した。
胃癌細胞株TMH-1、MKN-45、MKN-74に対し、DNA methyltransferaseのantisense oligonucleotideまたはnonsense oligonucleotideを2.5uMの濃度で前処置した後、抗癌剤5-FU(1.100ug/ml)またはCDDP(0.5.50ug/ml)を接触させ、抗癌剤感受性をMTT assayまたはBrdU uptake incorporation assay(BrdU assay)で判定した。
DNA methyltransferaseに対するantisense oligonucleotideの配列は、5-TCTATTTGAGTCTGCCATTT-3とした。nonsene oligonucleotideの配列は、5-TGTGATTCTCCTTATTCGA-3とし、antisense oligonucleotideの塩基配分と同様に作成した。
結果として、antisense群はnonsense群と比較して、5-FUに関しては、TMK-1、MKN-45で約20%の感受性の増強がみられ、感受性因子として、TS mRNA、DPD mRNAの発現を定量的PCR法を用いて測定したが、TS mRNAは両群で差がなく、DPD mRNAはantisense群で有意に低下していた。CDDPでもTMK-1、MKN-45で約15%の感受性の増強が認められた。
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