| Project/Area Number |
13770972
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Otorhinolaryngology
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
光沢 博昭 札幌医大, 医学部, 助手 (40325874)
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| Project Period (FY) |
2001 – 2002
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2002)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2002: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
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| Keywords | CD14 / Toll様受容体 / 自然免疫 |
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| Research Abstract |
平成13年度には以下の研究の進展があった.
1.上気道の感染防御機能を担っている口蓋扁桃においてToll様受容体2の発現を認めた.
2.Toll様受容体2(TLR2)を強制発現させたHEK293細胞株に対し、グラム陽性薗の菌体構成成分であるペプチドグリカン(PGN)を加えて刺激するとPGNの濃度依存性にNF-κBの活性化が誘導された.またこの反応は、従来よりPGNの受容体と考えられてきたが細胞内ドメインをもたないGPI結合蛋白であることにより、単独ではシグナル伝達できないと考えられてきたCD14を細胞膜に共発現させることにより増強した.
3.TLR2とCD14の細胞外ドメインにおけるPGN認識機構を調べるため、TLR2の細胞外ドメインをCD14に置換したキメラ体を作成したところ、このキメラ蛋白はPGN刺激に対しNF-κB活性化を誘導しなかった.従ってCD14は機能的にTLR2の細胞外ドメインに代替出来ないことが示された。
4.TLR2の細胞外ドメインにおけるPGNの認識機構を調べるために、TLR2の細胞外ドメインをN末端側より順に欠失させた欠失変異体を作成したところ、TLR2ΔCys30-Ile64,TLR2ΔSer40-Ile64の各欠失変異体ではPGN刺激に対するNF-κB活性化は誘導されなかったが、TLR2ΔCys30-Ser39ではNF-κBの活性化が誘導された.
以上の実験結果は、上気道におけるグラム陽性菌感染におけるTLR2の重要性を示すものであり、またTLR2のPGN認識にはそのN末端側領域が重要な役割を果たしていることを示している.
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