マイクロダイアリシスによる外リンパアセチルコリン放出メカニズムに関する研究

Research Project

Project/Area Number	13770985
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Otorhinolaryngology
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	瀧口洋一郎慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40306783)
Project Period (FY)	2001 – 2002
Project Status	Completed (Fiscal Year 2002)
Budget Amount *help	¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000) Fiscal Year 2002: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000) Fiscal Year 2001: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywords	蝸牛 / アセチルコリン / セロトニン / AMPA / microdialysis / guinea pig
Research Abstract	蝸牛の神経支配は、感覚細胞からの情報を蝸牛神経を経て中枢に送る求心系と、脳幹に起始細胞を持ち感覚細胞に神経終末を送る遠心系とに大別される。音響刺激による求心性神経の反応により遠心性神経が賦活されさらに求心性神経に対して影響を及ぼすフィードバック経路はEfferent acoustic reflexと呼ばれている。また従来より遠心性神経終末のトランスミッターはアセチルコリン(Ach)であると推定されており、合成酵素と分解酵素の存在が証明されている。今回我々は、グルタミン酸のアゴニストであるAMPAの外リンパ潅流による聴力障害モデルにおいて外リンパアセチルコリンの動態を観察した。また、外リンパアセチルコリン濃度の測定はin vivo microdialysis及びHPLC-ECDを組み合わせた方法を用いて行った。また外リンパアセチルコリンの動態におけるAMPAの効果を確認するため、AMPA型グルタミン酸受容体アンタゴニストであるCNQXを前投与することで同様の実験を行った。結果、AMPA潅流により外リンパアセチルコリン濃度は潅流前に比べ、約2-3倍に増加した。一方、CNQXを前投与した場合には外リンパアセチルコリン濃度の有意な変化をみとめなかった。今回の結果から、蝸牛求心性神経への刺激により外リンパにアセチルコリンが放出されることが示されたものと考える。また、近年内耳におけるセロトニンの存在が示されており、トランスミッターとしての役割が推定されている。同様の聴力障害モデル及び測定系に於いて、内耳においてセロトニンの測定が可能であった。