| Project/Area Number |
13771088
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Morphological basic dentistry
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| Research Institution | Kanagawa Dental College |
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Principal Investigator |
三好 代志子 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (70288075)
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| Project Period (FY) |
2001 – 2002
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2002)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2002: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
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| Keywords | Telomerase / hTERT / TRF / TRAP / in situ TRAP |
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| Research Abstract |
口腔粘膜上皮に発生する前癌病変、特に白板症・紅板症等に注目しTelomerase活性と関連遺伝子などを調べ組織学的所見と対比して良・悪性の境界病変の判定にどのように役たつか検討した。またTelomeraseを標的したそれら前癌病変の治療の可能性を検索した。
ヒト口腔領域原発の前癌病変組織において、(1)Telomerase活性の有無と発現強度を調べた。(2)Telomerase関連遺伝子の(hTERT遺伝子など)発現を見た。(3)In situ PCRによるTelomerase活性の微量検出法を試みた。(4)アポトーシス関連遺伝子(p53遺伝子・bcl-2遺伝子)の発現を見た。病理組織学的診断と対比することより、口腔領域に発生する前癌病変の良・悪性の早期診断に役立つものはどれかを、明らかにした。
1)生検および手術にて得られた口腔領域の前癌病変組織を、病理組織学的に判定した。
2)同時に採取した各新鮮組織よりDNA・RNAを抽出し、また核抽出液も作製した。
これを用いて、 (a)Telomere長TRFをサザンブロット法にて測定した。
(b)ヒトTelomerase逆転写酵素hTERT(human telomerase reverse transcriptase)・ヒトTelomerase付属蛋白質hTRF1/2(human telomerase repeat binding facter1/2)とアポトーシス関連遺伝子(p53遺伝子・bcl-2遺伝子)の発現をRT-PCR法にて測定した。
(c)PCR-プライマーエクステンションによるTelomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay法でTelomerase活性を測定するしたitu TRAP法を行いTelomerase活性の細胞レベルでの発現の有無を調べた。
口腔領域白板症・紅板症等においてTelomerase活性と組織学的所見と対比して良・悪性の境界病変の判定に有用で早期前癌病変の治療への可能性が期待できる事を示唆した。
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