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分子インプリント法を利用した酵素基質特異性の改変

Research Project

Project/Area Number 13875150
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 反応・分離工学
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

後藤 雅宏  九州大学, 工学研究院, 教授 (10211921)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 丸山 達生  九州大学, 工学研究院, 助手 (30346811)
上江洲 一也  北九州市立大学, 国際環境工学部, 助教授 (40253497)
Project Period (FY) 2001 – 2002
Project Status Completed (Fiscal Year 2002)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Fiscal Year 2001: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywords酵素反応 / 有機溶媒 / 界面活性剤 / 酵素複合体 / 生物工学 / 分子インプリント / タンパク質 / バイオテクノロジー
Research Abstract

本研究では、バイオインプリントの手法によって、酵素本来の特異性を人為的にどの程度まで模倣可能であるかを明確にすることを目的とした。
界面分子インプリント法により調製した人工酵素がどの程度天然の酵素と類似した触媒機能を有するかを検討した。まず最初に、認識部位を構築する機能性モノマーがポリマー表面に固定化できているかを評価した。界面分子インプリント法は、認識部位をポリマー表面に構築し基質との反応速度を向上させる手法である。認識部位構築にはエマルション油水界面への機能性モノマーの配向性を利用している。そこで新たに合成した界面配向性の高い機能性モノマー(長鎖イミダゾール誘導体)と配向性の低い機能性モノマーを用い人工酵素ポリマーを調製した。その結果、界面配向性の高い機能性モノマーほど、触媒活性が高いことが確認された。これは界面配向性の高い機能性分子を利用すれば、ポリマー表面への固定化が有利であることを示唆している。
さらに、人工酵素ポリマーの速度論解析を行った。その結果、基質をインプリントした人工酵素はインプリントしなかった酵素に比べ触媒速度がはるかに大きいことが確認された。
しかしながら、基質の取り込みに関しては2種の酵素で大きな差はみられなかった。人工酵素の認識部位に基質の取り込みを促進させる相互作用をいかに付与するかが今後の課題である。最後に、基質選択性の検討をおこなった結果、アミノ酸エステルの芳香環の有無が認識され、選択的に触媒可能であった。今後、認識部位に基質と多点相互作用するインプリント酵素を調製することで、不斉認識能を有する人工酵素の構築が期待できる。

Report

(2 results)
  • 2002 Annual Research Report
  • 2001 Annual Research Report
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    (12 results)

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All Publications (12 results)

  • [Publications] Eiichi TOORISAKA, Masahiro, GOTO: "A Molecular Imprinted Polymer that shows Enzymatic Activity"Biochemical Engineering J. Vol.10(In press). (2003)

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  • [Publications] Tatsuo MARUYAMA, Masahiro GOTO: "Ring-opening polymerization of lactones catalyzed by surfactant-coated lipases in organic solvents"J Chemical Engineering of Japan. Vol.95(In press). (2003)

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  • [Publications] Tatsuo MARUYAMA, Masahiro GOTO: "Enzymatic Synthesis of Sugar Amino Acid Esters in Organic Solvents"J. Bioscience and Bioengineering. Vol.94,No.4. 357-361 (2002)

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  • [Publications] Tatsuo MARUYAMA, Masahiro GOTO: "Polyethylene glycol-Lipase Complex Catalytically Active in Ionic Liquids"Biotechnology Letters. Vol.24,No.16. 1341-1345 (2002)

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  • [Publications] 丸山達生, 後藤雅宏: "マイクロ・バイオリアクターによる環境汚染物質の分解"化学工学論文集. 第29巻、第1号. 82-86 (2003)

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  • [Publications] 後藤雅宏, 丸山達生: "最近の化学工学54 バイオプロセスエンジニアリングの新展開"化学工業社. 17 (2002)

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  • [Publications] Tsutomu ONO, Masahiro.GOTO: "Catalytic oxidation of o-phenylendiamine by cytochrome cencapsulated in reversed micelles"J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 11. 955-959 (2001)

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  • [Publications] Shinya.OKAZAKI, Masahiro GOTO: "Preparation and Catalytic Performance of Surfactant-Manganese Peroxidase-Mnll Ternary Comple in Organic Media"Enzyme and Microbial Technology. 28. 329-332 (2001)

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  • [Publications] Masahiro GOTO, Shintaro FURUSAKI: "Chataritic performance of Lignine Peroxidase Alip-P3 in reversed Micelles"Biochemical Engineering J. Vol.8, No.2. 129-134 (2001)

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  • [Publications] Junji Michizoe, Masahiro GOTO: "Catalytic Activity of Laccase Hosted in Reversed Micelles"J. Bioscience and Bioeng. Vol.92, No.1. 67-71 (2001)

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  • [Publications] 迫口明浩, 後藤雅宏: "有機溶媒中で高活性を発現する界面活性剤-スブチリシン複合体の調製とその反応特性"化学工学論文集. 第27巻、第1号. 57-62 (2001)

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  • [Publications] Masdahiro GOTO, Shintaro FURUSAKI: "ACS Symposium Series 785:Oxidative Delignification Chemistry, Chapter13"One-Electron Oxidation Activity of Dendritic Porphyrin in Nonaqueous Media. 8 (2001)

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Published: 2001-04-01   Modified: 2016-04-21  

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