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ペスチウイルスの病原性発現の分子機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number 13J01199
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field 応用獣医学
Research InstitutionOsaka University (2015)
Hokkaido University (2013-2014)

Principal Investigator

田村 友和  大阪大学, 微生物病研究所, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2013-04-26 – 2016-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2015: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2013: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywordsペスチウイルス / ウイルスの複製 / 宿主指向性 / 宿主因子 / 病原性 / 宿主 / ウイルスの吸着と侵入 / 自然免疫
Outline of Annual Research Achievements

本研究は、ペスチウイルスの病原性発現の分子メカニズムを明らかにすることを目的とする。平成27年度は以下の研究を実施した。
I. ウイルスの複製に関与するウイルス蛋白と宿主因子の検索および同定  豚コレラウイルスの病原性発現に関与する非構造蛋白NS4BのN末端領域に認めた両親媒性ヘリックスのゲノム複製における役割を調べた。まず、非構造蛋白NS4BのN末端領域の二次構造をコンピュータソフトを用いて予測した。その成績を基に細胞内膜への親和性を膜分画アッセイおよび共焦点レーザー顕微鏡にて解析し、非構造蛋白NS4Bの細胞内膜への親和性に関与するアミノ酸部位を同定した。さらに、リバースジェネティクス法にて作出したレプリコンおよびウイルスを用いて両親媒性のヘリックス構造のウイルス感染環における役割を解析した。その結果、NS4BのN末端領域に認めた両親媒性のヘリックスはウイルスのゲノム複製およびその増殖に必須の構造であることがわかった。次に、非構造蛋白NS4Bと相互作用する蛋白質を哺乳動物ツーハイブリッド法にて検索した。その結果、NS4B蛋白のC末端領域とNS5A蛋白は相互作用することが明らかになった。
II. ウイルスの宿主指向性に関与する宿主因子の検索および同定  これまでに同じペスチウイルス属の牛ウイルス性下痢ウイルスは、宿主細胞のCD46およびLDLをレセプターとして細胞への侵入の際に利用することが明らかにされている。ブタのCD46と結合すると考えられる領域の近傍に、これまでに同定した豚コレラウイルスの病原性発現に関与するE2分子上のアミノ酸部位が存在した。本年度は、CD46が豚コレラウイルスの宿主指向性を規定する因子であるかを検するため、CRISPR-Cas9システムを用いてCD46を欠損した細胞を樹立することとした。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • 2013 Annual Research Report
  • Research Products

    (24 results)

All 2016 2015 2014 2013 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 5 results,  Acknowledgement Compliant: 5 results,  Open Access: 2 results) Presentation (17 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Int'l Joint Research] The Institute of Virology and Immunology(スイス)

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    • Journal Title

      Journal of General Virology

      Volume: 96 Issue: 9 Pages: 2623-2635

    • DOI

      10.1099/vir.0.000200

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    • Author(s)
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    • Journal Title

      Journal of Veterinary Medical Science

      Volume: 77 Pages: 341-343

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      Kozasa, T., Abe, Y., Mitsuhashi, K., Tamura, T., Aoki, H., Ishimaru, M., Nakamura, S., Okamatsu, M., Kida, H., Sakoda, Y.
    • Journal Title

      Journal of Veterinary Medical Science

      Volume: 77 Issue: 5 Pages: 511-518

    • DOI

      10.1292/jvms.14-0420

    • NAID

      130005071888

    • ISSN
      0916-7250, 1347-7439
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      Mine, J., Tamura, T., Mitsuhashi, K., Okamatsu, M., Parchariyanon, S., Pinyochon, W., Ruggli, N., Tratschin, JD., Kida, H., Sakoda, Y.
    • Journal Title

      Journal of General Virology

      Volume: 印刷中 Issue: 7 Pages: 1746-1756

    • DOI

      10.1099/vir.0.000132

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      Nagai, M., Aoki, H., Sakoda, Y., Kozasa, T., Tominaga-Teshima, K., Mine, J., Abe Y., Tamura, T., Kobayashi, T., Nishine, K., Tateishi, K., Suzuki, Y., Fukuhara, M., Ohmori, K., Todaka, R., Katayama, K., Mizutani, T., Nakamura, S., Kida, H., Shirai, J.
    • Journal Title

      Journal of Veterinary Diagnostic Investigation

      Volume: 26 Issue: 4 Pages: 547-552

    • DOI

      10.1177/1040638714541837

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      Tamura, T., Nagashima, N., Ruggli, N., Summerfield, A., Kida, H., Sakoda, Y.
    • Journal Title

      Veterinary Research

      Volume: 45 Issue: 1 Pages: 47-47

    • DOI

      10.1186/1297-9716-45-47

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      Tamura, T., Ruggli, N., Nagashima, N., Okamatsu, M., Summerfield, A., Kida, H., Matsuno, K., Sakoda, Y.
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      2015-09-09
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      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] 豚コレラウイルス非構造蛋白NS4Bの機能と病原性に及ぼす影響2015

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      田村友和、Nicolas Ruggli、長島尚史、岡松正敏、Artur Summerfield、松野啓太、喜田宏、迫田義博
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      田村友和、Nicolas Ruggli、Matthias Liniger、長島尚史、峯淳貴、岡松正敏、Martin A. Hofmann、Artur Summerfield、喜田宏、迫田義博
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      Tamura, T., Ruggli, N., Liniger,M., Nagashima, N., Mine, J., Okamatsu, M., Hofmann, MA., Summerfield, A., Kida, H., Sakoda Y.
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  • [Presentation] The N-terminal domain in NS4B of classical swine fever virus contributes to pathogenicity in pigs2014

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  • [Presentation] 豚コレラウイルス非構造蛋白NS4BのN末端領域は豚に対する病原性に関与する2014

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      第79回日本インターフェロン・サイトカイン学会学術集会
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      2014-06-19
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  • [Presentation] N-terminal domain of the non-structural protein NS4B of classical swine fever virus is responsible for the pathogenicity in pigs2014

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      Tamura, T., Ruggli, N., Nagashima, N., Mine, J., Summerfield, A., Hofmann, MA., Kida, H., Sakoda, Y.
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      Third Young Researcher’s Forum for infectious Diseases
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      北海道奈井江町
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      2013-07-20
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Published: 2014-01-29   Modified: 2024-03-26  

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