ｔ（８；２１）ＡＭＬ発症におけるＡＭＬ１－ＥＴＯタンパク質の機能解析

• Project/Area Number: 13J40160
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Pathological medical chemistry
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 奥村(城尾) 晶子 (2014, 2016) 名古屋大学, 理学研究科, 特別研究員(RPD); 奥村 晶子 (城尾 晶子) (2013, 2015) 名古屋大学, 特別研究員(RPD)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2017-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2016)
• Budget Amount: ¥4,320,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥720,000); Fiscal Year 2015: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2014: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2013: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: t(8;21)AML / AML1 / AML1-ETO

Outline of Annual Research Achievements

AML1/Runx1は造血に重要な転写因子であり、ETO/MTG8は転写抑制因子である。急性骨髄性白血病(AML)罹患患者の一部において検出される異常な融合タンパク質AML1-ETOは、ETOの転写抑制機能によりAML1に対してドミナントネガティブに働いてAMLを引き起こす癌遺伝子と考えられるが、その分子機構は不明である。本研究はAML1-ETOタンパク質の機能解析により、t(8;21)AML発症のメカニズムを解明することを目的とする。我々は、co-factorからAML1-ETOの機能を明らかにするために結合分子を探索し、特に興味深い新規AML1-ETO結合タンパク質AEBP(AML1-ETO binding protein)について機能解析を行っている。
昨年度までに、ヒト血球系培養細胞株等を用いた実験により、AML1とAEBPとの結合活性および相互作用について検討を行った。今年度は、血液系ガン患者特異的に検出される変異型AML1に着目した。変異型AML1とAEBPとの異常な相互作用により、疾患が誘導される可能性が考えられるためである。ヒトのMDS（骨髄異形成症候群）、慢性骨髄性白血病(CML)、あるいはAML患者において報告されている7種類の変異型AML1について発現ベクターを作成し、まず、AEBPとの結合活性について、免疫沈降法およびウエスタンブロッティングにより、野生型AML1との比較を行った。興味深いことに結合活性には顕著な差が見られた。次に、AEBPによる変異型AML1の転写活性への影響をレポーターアッセイにより検討したが、これらの変異体は転写活性を有さず、この実験系では結果が得られなかった。更に、siRNAを用いた実験により、AEBPによる変異型AML1タンパク質の安定性の制御は野生型に比べて弱いことが示された。現在、本研究について論文を準備中である。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Parallel Regulation of von Hippel-Lindau Disease by pVHL-Mediated Degradation of B-Myb and Hypoxia-Inducible Factor α. (2016)
  • Author(s): Okumura F, Uematsu K, Byrne SD, Hirano M, Joo-Okumura A, Nishikimi A, Shuin T, Fukui Y, Nakatsukasa K, Kamura T.
  • Journal Title: Molecular Cellular Biology Volume: 36 Issue: 12 Pages: 1803-1817
  • DOI: 10.1128/mcb.00067-16
  • NAID: 120005844088
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] ASB7 regulates spindle dynamics and genome integrity by targeting DDA3 for proteasomal degradation. (2016)
  • Author(s): Uematsu K, Okumura F, Tonogai S, Joo-Okumura A, Alemayehu DH, Nishikimi A, Fukui Y, Nakatsukasa K, Kamura T.
  • Journal Title: J Cell Biol Volume: 215(1) Pages: 95-106
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] pVHLはFOBとHIF-αの分解を介してVHL病を制御する (2014)
  • Author(s): 奥村 文彦、植松 桂司、松崎 真理子、平野 みえ、奥村 晶子、錦見 昭彦、金森 正和、執印 太郎、福井 宣規、中務 邦雄、 嘉村 巧
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27