認識機能を有する脂質膜の強相関的な集合構造の動的制御と機能解析

Research Project

Project/Area Number	14045264
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Science and Engineering
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	佐藤智典慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (00162454)
Project Period (FY)	2002 – 2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥3,700,000 (Direct Cost: ¥3,700,000) Fiscal Year 2003: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000) Fiscal Year 2002: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywords	糖脂質 / ペプチド / 脂質膜 / 認識 / ウィルス / 原子間力顕微鏡 / ラフト / 脂質単分子膜 / リポソーム / インフルエンザウイルス / 分子集合体 / 糖鎖認識
Research Abstract	本研究では生体膜モデルである単分子膜を用いた糖脂質あるいはペプチド脂質のドメイン構造の形成機構の要因である非共有結合について解析し、脂質膜構造と受容体機能との関連を解析した。スフィンゴ糖脂質を含んだ脂質組成の気-液界面単分子膜を作製し、マイカ基板などに累積して、脂質膜組成に依存したドメイン構造について原子間力顕微鏡(AFM)を用いて直接観察を行った。脂質の組成や単分子膜を形成する温度などの影響により特徴的なトポロジーが観察された。リン脂質のみの膜でも二つの相状態の混合膜になっていることが示された。ここにガングリオシドGM1を加えるとゲル相と思われる領域に集まっている様子が観察された。さらに、B16メラノーマ細胞から抽出した脂質膜を累積してAFM観察したところ、糖脂質と思われる集合構造が観察された。これにより、モデル膜で示された糖脂質の集合構造は生体膜でも形成されていることが示された。糖鎖の認識はペプチドで置き換えることができる。インフルエンザウイルスのヘマグルチニンに結合できる糖鎖レプリカペプチドをファージ提示ペプチドライブラリーから検索した。ヘマグルチニンに結合したファージを溶出する糖鎖の種類により異なるペプチド配列を得ることが出来た。得られたペプチドは異なる亜型のインフルエンザウイルスのヘマグルチニンに結合し、細胞へのウイルスの感染を阻害することが示された。