| Project/Area Number |
14656042
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
応用微生物学・応用生物化学
|
|---|
| Research Institution | Fukui Prefectural University |
|---|
Principal Investigator |
中森 茂 福井県立大学, 生物資源学部, 教授 (00254243)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高木 博史 福井県立大学, 生物資源学部, 教授 (50275088)
高橋 正和 福井県立大学, 生物資源学部, 助手 (80315837)
辻本 和久 セーレン株式会社, 開発研究第2部, 研究員
|
|---|
| Project Period (FY) |
2002 – 2004
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2004)
|
| Budget Amount *help |
¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 2004: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2003: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
|
|---|
| Keywords | セリシンタンパク質 / タンパク質工学 / 組換えセリシン / 昆虫細胞Sf9 / 細胞死抑制 / アポトーシス / 生理活性ペプチド / 組み換えセリシン / 昆虫細胞 / 反復配列 / 増殖促進 / カイコ幼虫 / 中部絹糸腺 / 大腸菌による生産 |
|---|
| Research Abstract |
絹タンパク質、セリシンにはSer、Thrなどの親水性アミノ酸残基に富む38残基の特徴的なアミノ酸配列が含まれている。本研究ではこれまでにセリシンの加水分解物や、上記38残基が2回連続したペプチドが昆虫細胞Sf9の血清中での細胞死に対して抑制活性があることを示してきたが、本年度の研究で以下のような新しい発見があった。
1)38残基ペプチドの細胞死抑制効果の活性中心が10残基のペプチドSP3にあることを示した。この配列はSGGSSTYGYSである。
2)SP3のC末端-YGYSをWGWSに変えても活性に差はないが、-AGASに変えると活性がなくなった。この事実からTyr, Trpなどの芳香族アミノ酸が活性に重要な役割を果たしていることが示された。
3)NおよびC末端のSを削除したペプチドでは活性が大幅に低下した。このことからSerも重要な役割を持つことが示された。
4)昆虫細胞Sf9の16時間培養後のDNAの電気泳動の解析によって明瞭なヌクレオソーム単位毎の特異的な切断が観察され、この細胞の死がアポトーシスによること、セリシンの加水分解物の添加がアポトーシスを抑制することが示された。
|
