冠動脈および大動脈の血管内皮に発現する新規接着分子の解析

• Project/Area Number: 14657240
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Hematology
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20282527)
• Project Period (FY): 2002 – 2003
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2003)
• Budget Amount: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2003: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2002: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
• Keywords: シグナルシークエンストラップ / 膜蛋白質 / 血管平滑筋 / TGF-β / シグナル伝達 / TGFβ / 大動脈 / 心臓 / レセプター / シグナル

Research Abstract

我々のグループが開発したレトロウイルスベクターを利用したシグナルシークエンストラップ法SST-REXによりヒト心臓に発現している膜蛋白質および分泌蛋白質をスクリーニングした。
スクリーニングの結果いくつかの新規分子が得られ、そのうち特徴的なロイシンリッチリピートを有して分子に着目し遺伝子全長を単離後、機能解析を行った。バゾリンと名付けたこの分子はロイシンリッチリピートドメインを細胞外に有する典型的な1型膜タンパク質で、in situ hybridization analysisによりその発現は血管平滑筋細胞特異的であることが判明した。またバゾリンの発現は血管平滑筋細胞の分化とともに増加し、脱分化とともに減少した。細胞外ドメインに存在するロイシンリッチリピートドメインは蛋白質相互作用に関与することがよく知られており当初バゾリンが接着分子としてインテグリンなど接着分子に結合する可能性を調べたが、特異的な結合は検出されなかった。その後、バゾリンとTGF-βの相互作用を調べ、両者が直接結合することを見いだした。また下流のシグナル伝達系を調べたところ、TGF-βシグナルはバゾリンにより負に制御されることが示された。また逆にTGF-β刺激によりバゾリンの発現がラット培養血管平滑筋細胞において有意に増強されることも判明した。以上より、バゾリンは血管平滑筋細胞特異的なTGF-βシグナルの負のフィードバック調節因子であることがわかった。
現在、以下の論文を投稿中
・論文標題:Vasorin, a novel TGF- -binding protein expressed in vascular smooth muscle cells, modulates the arterial response to injury in vivo
・著者名:Y.Ikeda, Y.Imai, H.Kumagai, T.Nosaka, Y.Morikawa, T.Hisaoka, I.Manabe, K.Maemura, T.Nakaoka, T.Imamura, K.Miyazono, I.Komuro, R.Nagai, and T.Kitamura

Research Products

• [Publications] Tulin, E.E.: "Genetic approach and phenotype-based complementation screening for identification of stromal cell-derived proteins involved in cell proliferation"Exp.Cell Res.. 272. 23-31 (2002)
• [Publications] Tulin, E.E.: "Inhibition of human endothelial cell proliferation by ShIF, a vacuolar H+-ATPAse-like protein"Oncogene. 21. 844-848 (2002)
• [Publications] Nosaka, T.: "Pim-1 expression is sufficient to induce cytokine independence in murin hematopoietic cells but is dispensable for BCR-ABI-mediated transformation"Exp.Hematol.. 30. 697-702 (2002)
• [Publications] Perez, O.D.: "Acitivation of the PKB/AKT pathway by ICAM-2"Immunity. 16. 51-65 (2002)
• [Publications] Nagai, Y.: "Essential role of MD-2 in LPS responsiveness and TLR4 distribution"Nat.Immunol.. 3. 667-672 (2002)
• [Publications] Gugasyan, R.: "Dok-related protein negatively regulates T cell development ts RasGTPase activating protein and Nck docking sites"J.Cell Biol.. 158. 115-125 (2002)
• [Publications] Stoeclin, G.: "Functional cloning of BRF-1, a regulator of ARE-dependent mRNA turnover"EMBO J.. 21. 4709-4718 (2002)
• [Publications] Komano, H.: "A new functional screening system for the identification of DNA encoding a regulator of γ-cleavage"J.Biol.Chem.. 277. 39627-39633 (2002)
• [Publications] Ezoe, S.: "GATA-2 affects cytokine-dependent growth of hematopoietic cells through accumulation of p21^<WAF1> and p27^<Kip1> proteins"Blood. 100. 3512-3520 (2002)
• [Publications] Yujiri, T.: "MEK kinase 1 interacts with focal adhesion kinase and regulates insulin receptor substrate-1 expression"J.Biol.Chem.. (in press). (2003)
• [Publications] Minoshima, Y.: "Aurora B Phosphorylates MgcRacGAP and Induces RhoGAP Activity during M Phase : Identification of a RhoGAP Indispensable for Cytokinesis"Developmental Cell. (in press). (2003)
• [Publications] Nosaka, T.: "Dwarfism and lymphoid deficiency in mice lacking twisted gastrulation"Mol.Cell.Biol.. (in press). (2003)
• [Publications] Kitamura, T.: "Retrovirus-mediated gene transfer and expression cloning, powerful tools in functional genomics"Exp.Hematol.. (in press). (2003)