| Project/Area Number |
14657282
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
General surgery
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
稲本 俊 京都大学, 医学部, 教授 (10135577)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 大典 京都大学, 医学部附属病院, 助手 (70324621)
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| Project Period (FY) |
2002 – 2003
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2003)
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| Budget Amount *help |
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2002: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
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| Keywords | 脂肪組織再生 / 塩基性線維芽細胞増殖因子 / basic fibroblast growth factor / 遺伝子導入 / 組織幹細胞 / vascular-stromal細胞 / 塩基性繊維芽細胞増殖因子 / vascular-stroma細胞 |
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| Research Abstract |
倫理委員会の承認のもとに術前に患者からの承諾を得て乳癌手術標本から採取したヒト皮下脂肪組織からvascular-stromal細胞(VS細胞)を分離し、アデノウイルスをベクターとして塩基性繊維芽細胞増殖因子(basic fibroblast growth factor : bFGF)の遺伝子を導入し、in vitroでの増殖、分化に与える影響について検討した。さらに、ヌードマウスに移植し、in vivoでの脂肪組織再生について検討した。
bFGF遺伝子導入したVS細胞をin vitroで培養すると核から細胞質にbFGF蛋白を発現してくることが免疫組織染色で確認され、培養上清中にも放出していることがELISAにより認められた。このbFGF遺伝子導入細胞はrecombinantのbFGFを添加した遺伝子非導入のVS細胞と同等の増殖を示し、その増殖促進状態はbFGFの中和抗体により完全に抑制された。また、遺伝子導入後3日目にinsulin、dexamethazoneを含む脂肪分化培地に変更にすると、bFGF遺伝子導入VS細胞も脂肪滴を細胞質内に持つ成熟脂肪細胞へ分化することが観察された。
bFGF遺伝子導入VS細胞をtype I collagenをscafoldとしてヌードマウスの背部皮下に移植し、経時的に形態の変化と組織学的な変化を観察した。bFGF遺伝子導入VS細胞を移植したものは、非導入VS細胞にbFGFを徐放化して添加したものと同じように脂肪組織の再生が認められた。
以上の結果から、bFGF遺伝子導入したVS細胞は発現したbFGF蛋白がautocrineの機構で作用して増殖し、かつ成熟脂肪細胞への分化能も維持していることが明らかになった。また、その増殖分化の形質はin vivoでも保持され、脂肪組織再生の細胞源として有用である可能性が示された。
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