| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2002: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Research Abstract |
口腔癌細胞株における新規癌抑制遺伝子ING1,ING2の発現を検討するために、p33ING1,p33ING2の特異的なアミノ酸配列であるMLSPANGEQLHLVNYVE(ING1),QQLYSSAALLTGERSRLLTC(ING2)に対する抗体を作製した。
この抗体により、口腔癌細胞株、口腔癌組織におけるp33ING1,p33ING2の発現を、Western Blotting法により検討するとともに、正常口腔粘膜上皮ならびに口腔扁平上皮癌組織に対し、Western Blotting法ならびに免疫組織化学的検索により発現を検討した。
その結果、口腔扁平上皮癌細胞株10株においてING1,ING2は、その発現量に相違は認めるものの、検索したすべての検体において発現を認めた。また、ING1,ING2の発現量に相関はなく、これらの発現量と細胞増殖活性の関係も見いだせなかった。正常口腔粘膜上皮、前癌病変ならびに口腔癌組織においてもING1,ING2とも核にその発現を認め、これらの陽性細胞率や、発現量と腫瘍の増殖活性やリンパ節転移能などは相関しなかった。一方で、免疫沈降法により、p53との結合能を検討したところ、ING1,ING2ともに結合能が消失している細胞が見いだされた。以上より、ING1、ING2の欠失は口腔癌ではほとんど生じていないものの、いくらかの口腔癌においては、p53との結合異常による機能異常が生じ、癌化に関与している可能性が示唆された。なお、ING1、ING2の欠失した口腔扁平上皮癌細胞を見いだせなかったことから、pcDNA3-p33ING1,p33ING2の発現ベクターによる遺伝導入は行わなかった。
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