リピドーム解析とプロテオーム解析を応用した新規脂質代謝酵素の同定と生理機能解析
| Project/Area Number |
14760079
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
食品科学・栄養科学
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
森山 達哉 京都大学, 農学研究科, 助手 (60239704)
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| Project Period (FY) |
2002 – 2004
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2004)
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| Budget Amount *help |
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2004: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2003: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
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| Keywords | 脂質代謝 / 脂質性メディエーター / プロテオーム解析 / リピドーム解析 / 2次元電気泳動 / リポタンパク質代謝 / VLDL / レジスチン / 脂質転送 / 蛍光検出 / MTP / ウエスタンブロッティング / 2-アラキドノイルグリセロール / ジアシルグリセロール / リパーゼ / クローニング |
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| Research Abstract |
申請者は脂質性メディエーターの産生機構の解明や脂質代謝、リポタンパク質代謝に関わる酵素類及びその機能を調節しうる食品成分に関して研究を進めている。これまでに、新規な脂質性メディエーターである2-AG(2-アラキドノイルグリセロール)の産生に関わると推定されるDGリパーゼの精製や候補遺伝子である新規リパーゼ様遺伝子のクローニングに成功した。また、クローニングした新規脂質代謝関連遺伝子産物が生体内でどのような脂質分子を基質として、どのような触媒反応を担当するのかという点に関して、遺伝子を導入した細胞の脂質プロファイルの解析(リピドーム解析:生体中の脂質成分を一括定量比較解析する手法)を用いて解析した。さらに、遺伝子導入細胞または共存培養細胞(ターゲット細胞)のタンパク質リン酸化のプロファイルを抗リン酸化タンパク質抗体を用いたプロテオーム解析によって解析する基盤技術が確立できた。
さらに、本研究を発展させ、以下の2つの研究も行った。(1)脂肪細胞が分泌する代謝調節性ホルモンと推定されるレジスチンに関して、その生体内での役割を解明することをめざし、レジスチンの生理機能をトランスクリプトーム解析によって詳細に検討した。(2)肝細胞からのリポタンパク質分泌をモニターするELISAシステムを構築し、リポタンパク質(VLDL)分泌に影響を与える食品成分の探索に成功した。現在は、リピドーム解析とプロテオーム解析、トランスクリプトーム解析を駆使して、VLDL分泌抑制のメカニズムを解明することを試みている。
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Report
(3 results)
Research Products
(10 results)
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[Publications] Moriyama, T., Kishimoto, K., Nagai, K., Urade, R., Ogawa, T., Utsumi, S., Maruyama, N., Maebuchi, M.: "Soybean β-conglycinin diet suppresses serum triglyceride levels in normal and genetically obese mice by induction of □β-oxidation, downregulation of fatty acid synthase and inhibition of triglyceride absorption."Biosci.Biotechnol.Biochem.. 68・2. 352-359 (2004)
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