酵母様真菌カンジタ属におけるアゾール剤ヘテロレジスタンスの臨床細菌学的研究

Research Project

Project/Area Number	14770219
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	内科学一般
Research Institution	Kinki University
Principal Investigator	山住俊晃近畿大学, 医学部, 講師 (50248035)
Project Period (FY)	2002 – 2004
Project Status	Completed (Fiscal Year 2004)
Budget Amount *help	¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000) Fiscal Year 2004: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000) Fiscal Year 2003: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000) Fiscal Year 2002: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords	カンジダ / フルコナゾール / ヘテロレジスタンス
Research Abstract	国内各地で血液などの臨床材料より検出されたカンジダ属200株を対象に、Etest(薬剤濃度勾配拡散法)の変法(macro法)を用いて、フルコナゾールheteroresistance subpopulationの簡易判定法でスクリーニングを行った結果、6株で阻止円内に明らかなマクロコロニーが見いだされ、(200株中;3%)、5株で阻止円の辺縁部にのみマクロコロニーが認められた(200株中;2.5%)。これら11株の菌種内訳は、C.parapsilosis2株、C.tropicalis1株、C.glabrata8株であった。ポピュレーション解析を行った結果、C.tropicalis1株は耐性クローン数が多く、homoresistanceを示唆する結果となったが、他は1×10^<-4>程度の頻度で耐性クローンを有するheteroresistanceが確認された。さらに、ポピュレーション解析で得られた耐性クローンについて、再度ポピュレーション解析を行った結果、すべて耐性の均一なポピュレーションが得られ、heteroresistance株では、薬剤曝露によって容易にhomoresistanceが得られることが明らかになった。続いてこれらの高度耐性クローンを薬剤不含培地で継代培養し、薬剤耐性の安定性について検討した結果、菌種間で異なる結果が得られた。すなわち、C.parapsilosis2株はそれぞれ1継代と7継代で元のheteroreisitantな耐性レベルに復帰したのに対し、C.glabrata8株では6株が元の耐性レベルに復するのに20継代から30継代を要し、残る2株は80継代を過ぎても耐性クローンの存在率は親株よりも明らかに高く、現在も安定化試験を継続中である。文献的にも、C.glabrataは、世界各地でフルコナゾール耐性率が異なること、耐性率の上昇傾向が見られること、治療経過中の耐性化報告が見られるなど、他菌腫とやや異なる傾向を示している。今回得られたC.glabrataが他菌種よりheteroresistance株が多いこと、heteroresistance株から薬剤曝露によって得たhomoresistance株が比較的安定であることなどの生物学的性状は、これらの現象と関連がある可能性がある。現在、安定化試験を継続するとともに、耐性遺伝子の発現レベルについて検討中である。