フィロウイルスの生態および病原性に関わる分子メカニズムの解明

• Project/Area Number: 14J00026
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Veterinary medical science
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 丸山 隼輝 北海道大学, 獣医学研究科, 特別研究員(DC2)
• Project Period (FY): 2014-04-25 – 2016-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2015)
• Budget Amount: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000); Fiscal Year 2015: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2014: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: フィロウイルス / レセプター / 疫学調査 / レセプター検索 / 抗体調査 / 国際研究者交流 / インドネシア / ザンビア / アメリカ合衆国

Outline of Annual Research Achievements

エボラウイルスは感染するがマールブルグウイルスは感染しないヤエヤマオオコウモリ由来の細胞株であるFBKT1細胞のフィロウイルスの感染性の差を規定している宿主因子の同定することを目的として実験を行った。FBKT1細胞を免疫原としたモノクローナル抗体を作出した。作出したモノクローナル抗体、約2000株のうち、FBTK1細胞へのフィロウイルスの感染を阻害すると考えられる抗体をスクリーニングした結果、4株のモノクローナル抗体が得られた。これら4株のモノクローナル抗体を用いて、Expression Cloningを行うことでFBKT1細胞上に発現する、フィロウイルスの感染性の差を生み出す分子を特定することができると考えられる。
またFBKT1細胞にフィロウイルスに感受性を持つVero E6細胞由来のFusion factorであるNPC1を発現させたところ、エボラウイルスのGPのを持つ水胞性口炎ウイルス (VSV) シュードタイプは感染性が増強し、マールブルグウイルスのGPを持つVSVシュードタイプは感染性を獲得した。現在はFBKT1細胞からNPC1の相同遺伝子のクローニングを実施している。
フィロウイルスの疫学調査のため、ザンビア、フィリピンで採取したコウモリおよびブタのサンプルを用いて抗体保有状況の調査およびウイルス遺伝子の検出を行った。フィロウイルスのGPに対して特異的な抗体を検出することができたが、ウイルス遺伝子の検出には至らなかった。今後も疫学調査を継続して実施していく必要があると考える。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Discovery of an antibody for pan-ebolavirus therapy (2016)
  • Author(s): Furuyama D, Marzi A, Nanbo A, Haddock E, Maruyama J, Miyamoto H, Igarashi M, Yoshida R, Dr. Noyori O, Feldmann H, Takada A
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 6 Issue: 1 Pages: 20514-20514
  • DOI: 10.1038/srep20514
  • NAID: 120005906783
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Characterization of the glycoproteins of bat-derived influenza viruses. (2016)
  • Author(s): Maruyama J, Nao N, Miyamoto H, Maeda K, Ogawa H, Yoshida R, Igarashi M, Takada A
  • Journal Title: Virology Volume: 488 Pages: 43-50
  • DOI: 10.1016/j.virol.2015.11.002
  • NAID: 120005906991
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A Single Amino Acid in the M1 Protein Responsible for the Different Pathogenic Potentials of H5N1 Highly Pathogenic Avian Influenza Virus Strains (2015)
  • Author(s): Nao N, Kajihara M, Manzoor R, Maruyama J, Yoshida R, Muramatsu M, Miyamoto H, Igarashi M, Eguchi N, Sato M, Kondoh T, Okamatsu M, Sakoda Y, Kida H, Takada A
  • Journal Title: PLoS One Volume: 10(9) Issue: 9 Pages: e0137989-e0137989
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0137989
  • NAID: 120005672370
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Seroepidemiological prevalence of multiple species of filoviruses in fruit bats (Eidolon helvum) migrating in Africa. (2015)
  • Author(s): Hirohito Ogawa, Hiroko Miyamoto, Eri Nakayama, Reiko Yoshida, Ichiro Nakamura, Hirofumi Sawa, Akihiro Ishii, Yuka Thomas, Emiko Nakagawa, Keita Matsuno, Masahiro Kajihara, Junki Maruyama, Manabu Igarashi, Kimihito Ito, Ayato Takada et al
  • Journal Title: Journal of Infectious Diseases Volume: jiv063 Issue: suppl 2 Pages: S101-S108
  • DOI: 10.1093/infdis/jiv063
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A polymorphism of the TIM-1 IgV domain: Implications for the susceptibility to filovirus infection. (2014)
  • Author(s): Makoto Kuroda, Daisuke Fujikura, Osamu Noyori, Masahiro Kajihara, Junki Maruyama, Hiroko Miyamoto, Reiko Yoshida, Ayato Takada.
  • Journal Title: Biochemical and biophysical research communications Volume: 455 Issue: 3-4 Pages: 223-228
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.10.144
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] コウモリ由来インフルエンザウイルスの糖タンパク質の解析 (2016)
  • Author(s): 丸山隼輝
  • Organizer: 5th Negative Strand Virus-Japan
  • Place of Presentation: 沖縄 ホテルモントレ沖縄
  • Year and Date: 2016-01-25
• [Presentation] Characterization of the glycoproteins of bat-derived influenza viruses (2015)
  • Author(s): Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • Organizer: 第63 回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡 福岡国際会議場
  • Year and Date: 2015-11-22
• [Presentation] Characterization of the hemagglutinin of bat-derived influenza viruses (2015)
  • Author(s): Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • Organizer: The 3rd Sapporo Summer Seminar for One Health
  • Place of Presentation: 札幌 北海道大学
  • Year and Date: 2015-09-16
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Characterization of the Hemagglutinin of Bat-derived Influenza Viruses. (2015)
  • Author(s): Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • Organizer: Negative Strand Virus Meeting
  • Place of Presentation: Siena, Italy
  • Year and Date: 2015-06-14
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Characterization of the envelope glycoprotein of a novel filovirus, Lloviu virus. (2014)
  • Author(s): Junki Maruyama, Hiroko Miyamoto, Masahiro Kajihara, Hirohito Ogawa, Ken Maeda, Yoshihiro Sakoda, Reiko Yoshida, and Ayato Takada
  • Organizer: International Union of Microbiological Societies 2014
  • Place of Presentation: Montreal, Canada
  • Year and Date: 2014-07-27 – 2014-08-02
• [Presentation] 新規フィロウイルスLloviu virusの性状解析 (2014)
  • Author(s): 丸山隼輝, 宮本洋子, 前田健, 小川寛人, 迫田義博, 高田礼人
  • Organizer: 日本ウイルス学会北海道支部会第47回夏季シンポジウム
  • Place of Presentation: 北海道、日本
  • Year and Date: 2014-07-12 – 2014-07-13
• [Patent(Industrial Property Rights)] 全てのエボラウイルス種の感染性を中和するモノクローナル抗体 (2015)
  • Inventor(s): 高田礼人、吉田玲子、古山若呼、宮本洋子、丸山隼輝
  • Industrial Property Rights Holder: 高田礼人、吉田玲子、古山若呼、宮本洋子、丸山隼輝
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Filing Date: 2015-08-19