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EBウイルスがコードするDNAポリメラーゼの機能ドメインの詳細な解析

Research Project

Project/Area Number 14J01982
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Virology
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

成田 洋平  名古屋大学, 医学系研究科, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2014-04-25 – 2017-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2016)
Budget Amount *help
¥3,170,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2016: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2015: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
KeywordsEpstein-Barr virus / ウイルスゲノム複製 / ヘルペスウイルス / EBウイルス / BAC
Outline of Annual Research Achievements

本研究ではBurkitt lymphomaを引き起こす原因ウイルスであるEpstein-Barr virus(EBV)がコードするDNAポリメラーゼ(Pol)に着目し、ウイルス産生感染時のウイルスゲノム複製を詳細に解析することを目的とした。特に、ヘルペスウイルス科のウイルスがPolに保存している特徴的なアミノ酸配列に着目し、このアミノ酸配列がEBVのウイルスゲノム複製においてどのように寄与しているのかを詳細に解析することを目指した。
平成27年度までに、このEBV Polのアミノ酸配列に変異を入れた組換えウイルスおよび感染細細胞(HEK293-EBV-BAC)を樹立し、アミノ酸配列を欠失あるいは変異させたウイルス感染細胞ではウイルスゲノム複製の効率が著しく低下することを明らかにした[Narita, Y. et al. Sci. Rep. 5, 11767; doi: 10.1038]。
平成28年度では、このアミノ酸配列がヘルペスウイルス特異的なものであるため、本研究課題が抗ウイルス薬開発等へ発展する可能性が高いと考え、アミノ酸配列のウイルス複製における作用メカニズムを明らかにすることを目指した。GST pulldown法や免疫沈降法にて得られた沈降物を質量分析装置で網羅的に解析することでEBV Polのアミノ酸配列と機能的に相互作用するタンパク質の同定を目指したが、適切な条件を見つけ出すことができなかった。これらは今後の検討課題であると考えている。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2016 Annual Research Report
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2016 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] A Herpesvirus Specific Motif of Epstein-Barr Virus DNA Polymerase Is Required for the Efficient Lytic Genome Synthesis2015

    • Author(s)
      Narita Y, Sugimoto A, Kawashima D, Watanabe T, Kanda T, Kimura H, Tsurumi T, Murata T
    • Journal Title

      Sci Rep

      Volume: 5 Issue: 1 Pages: 11767-11767

    • DOI

      10.1038/srep11767

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] Cloning of type 2 EBV genomes from two Burkitt lymphoma cell lines, Jijoye and P3HR-12016

    • Author(s)
      Yohei Narita, Teru Kanda, Hiroshi Kimura, Takayuki Murata
    • Organizer
      17th International Symposium on" "EBV and associated diseases
    • Place of Presentation
      チューリッヒ(スイス連邦)
    • Year and Date
      2016-08-08
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] ヘルペスウイルスDNAポリメラーゼに特異的なアミノ酸モチーフはEBウイルスのウイルスゲノム複製に必要である2015

    • Author(s)
      成田洋平、木村宏、村田貴之
    • Organizer
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド(兵庫県神戸市)
    • Year and Date
      2015-12-01
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] EBウイルスDNAポリメラーゼのPre-NH2ドメインの機能解析2014

    • Author(s)
      成田洋平、村田貴之、神田輝、五島典、木村宏、鶴見達也
    • Organizer
      第62回日本ウイルス学会学術集会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2014-11-10 – 2014-11-12
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] A conserved motif in the pre-N-terminal domain of Epstein-Barr virus DNA polymerase Catalytic subunit is required for the de novo EBV genome synthesis2014

    • Author(s)
      Yohei Narita, Takayuki Murata, Teru Kanda, Hiroshi Kimura and Tatsuya Tsurumi
    • Organizer
      The 39th annual international herpesvirus workshop
    • Place of Presentation
      神戸国際展示場(兵庫県神戸市)
    • Year and Date
      2014-07-19 – 2014-07-23
    • Related Report
      2014 Annual Research Report

URL: 

Published: 2015-01-22   Modified: 2024-03-26  

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