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ミクログリアによるニューロン貪食における新規N結合型糖鎖の機能の解明

Research Project

Project/Area Number 14J03075
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Neurochemistry/Neuropharmacology
Research InstitutionThe Graduate University for Advanced Studies

Principal Investigator

半田 麻衣 (2015)  総合研究大学院大学, 生命科学研究科, 特別研究員(DC2)

鳴海 麻衣 (2014)  総合研究大学院大学, 生命科学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2014-04-25 – 2016-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2015: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywordsシアル酸化N結合型糖鎖 / Siglec-H / 6-sialyl-LewisC / Calreticulin / カルレティキュリン(CRT) / SiglecH / シナプス除去 / 糖転移酵素
Outline of Annual Research Achievements

本年度申請者は昨年度から継続して以下の実験を行なった。
1)6-siayl-LewisC構造に結合するレクチンの同定。申請者は大阪大学理学研究科深瀬研究室と名古屋大学医学研究科木山研究室との共同研究により、ミクログリア特異的レクチンであるSiglec-Hと6-siayl-LewisC構造との結合をBiacoreを用いて調べた。昨年の研究を踏まえ、より6-siayl-LewisC構造に近いLewisC構造(6-siayl-LewisCからシアル酸を除いた構造)をコントロールとして用い、シアル酸一個の付加がSiglec-Hとの相互作用に必須であることを示した。
2)Calreticulin(CRT)の神経細胞内での局在解析。細胞成分分画法により12週令マウス脳から精製したシナプトソーム画分を二次元電気泳動により展開し、質量分析によるタンパク質同定と高速液体クロマトグラフィーによる糖鎖解析を行なった。その結果、CRTがシナプトソーム画分に存在することが明らかとなった。また、CRTの存在するゲル断片から6-siayl-LewisC構造が付加する糖鎖構造を検出した。さらにSTED顕微鏡を用いた免疫染色後初代培養ニューロンの観察ではCRTの一部がニューロンの後シナプス構造のマーカーであるPSD95のごく近傍に発現していた。
Siglec-HやCRTはそれぞれミクログリアによるニューロンの貪食を制御していることが明らかになっている。ニューロンの貪食やシナプスの安定化等に関与するニューロン-ミクログリア間相互作用にCRT上の6-siayl-LewisC構造とSiglec-H間の結合が寄与することを示すのが今後の課題である。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Determination of major sialylated N-glycans and identification of branched sialylated N-glycans that dynamically change their content during development in the mouse cerebral cortex.2014

    • Author(s)
      Torii T, Yoshimura T, Narumi M, Hitoshi S, Takaki Y, Tsuji S, Ikenaka K
    • Journal Title

      Glycoconjugate Journal

      Volume: 31(9) Pages: 671-683

    • DOI

      10.1007/s10719-014-9566-2

    • Related Report
      2014 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 6-sialyl-lewisc on n-glycan may be involved in microglial phagocytosis of neuron2015

    • Author(s)
      Mai Handa
    • Organizer
      25th meeting of the International Society for Neurochemistry
    • Place of Presentation
      Cairns, Australia
    • Year and Date
      2015-08-24
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] Studies on a novel sialylated N-glycan expressed in the mouse brain.2014

    • Author(s)
      Narumi M, Yoshimura T, Torii T, Ikenaka K
    • Organizer
      The 12th Biennial Meeting of the Asia-Pacific Society for Neurochemistry
    • Place of Presentation
      Howard Plaza Hotel Kaohsiung (Kaohsiung, Taiwan)
    • Year and Date
      2014-08-23 – 2014-08-26
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] マウス脳内における新規N結合型糖鎖の解析2014

    • Author(s)
      鳴海麻衣、吉村武、鳥居知宏、小西博之、木山博資、池中一裕
    • Organizer
      第33回日本糖質学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋大学豊田講堂(愛知県名古屋市)
    • Year and Date
      2014-08-10 – 2014-08-12
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] Studies on a novel sialylated N-glycan expressed in the mouse brain2014

    • Author(s)
      鳴海麻衣、吉村武、鳥居知宏、池中一裕
    • Organizer
      第78回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • Place of Presentation
      名古屋大学野依記念学術交流会館(愛知県名古屋市)
    • Year and Date
      2014-05-24
    • Related Report
      2014 Annual Research Report

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Published: 2015-01-22   Modified: 2024-03-26  

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