核内チロシンリン酸化シグナルによるクロマチン構造制御メカニズムの解明
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14J04367
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
Functional biochemistry
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| Research Institution | Kumamoto University (2015)
Chiba University (2014) |
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Principal Investigator |
久保田 翔 熊本大学, 国際先端医学研究機構, 特別研究員(PD)
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| Project Period (FY) |
2014-04-25 – 2016-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2015)
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| Budget Amount *help |
¥2,170,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2015: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | クロマチン / 核マトリクス / クロマチン構造変換 / KAP1 / Src / AKAP8 / ヘテロクロマチン / 分子生物学 / シグナル伝達 / ホスホプロテオミクス / 薬学 / 細胞 / チロシンキナーゼ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度はin vivo, in vitroの両方向からの解析を行なった。in vivoの解析では私が以前、核内チロシンリン酸化基質として同定したKAP1のノックアウトマウスを用いた解析を行なった。具体的には、造血幹細胞の分化を解析する系を利用して調べた。造血幹細胞の増殖分化においてKAP1はおよびチロシンリン酸化シグナルは重要な役割をもっている。KAP1ノックアウトマウスの造血幹細胞をセルソーターを用いて分取し、野生型のKAP1とチロシンリン酸化されない変異体をレトロウィルスベクターのインフェクションによって発現させ、レシピエントマウスに移植し、その分化増殖への影響を解析した。In vitroの解析では、核内チロシン基質群の中でヒストン修飾に関わる分子として A-kinase anchoring protein 8 (AKAP8) に着目した。AKAP8はクロマチンや核マトリクスに結合し、ヒストン脱アセチル化酵素であるhistone deacetylase 3 (HDAC3) などの分子のリクルートに関わっていることが知られている。昨年度の解析からAKAP8はチロシンキナーゼによってチロシンリン酸化されることで、クロマチンや核マトリクスとの結合が弱められることが示唆された。AKAP8のチロシンリン酸化による機能変化を解析するために、私はAKAP8の中でチロシンリン酸化されるチロシン残基をチロシンリン酸化されないフェニルアラニンに置換した変異体の作製を行なった。複数の部位のチロシンを置換した変異体では結合の変化がキャンセル出来た。このことから、AKAP8の結合の変化は一か所のチロシン残基のリン酸化によって制御されているのではなく、複数の部位のチロシンリン酸化によって制御されていることがわかった。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(9 results)
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[Journal Article] Overexpression of Zinc-finger protein 777 (ZNF777) inhibits proliferation at low cell density through down-regulation of FAM129A.2015
Author(s)
Yuki, R., Aoyama, K., Kubota, S., Yamaguchi, N.-t., Kubota, S.-i., Hasegawa, H., Morii, M., Huang, X., Liu, K., Williams, R., Fukuda, M.N., and Yamaguchi, N.
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Journal Title
J. Cell. Biochem.
Volume: in press
Issue: 6
Pages: 954-968
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Lyn tyrosine kinase promotes silencing of ATM-dependent checkpoint signaling during recovery from DNA double-strand breaks.2014
Author(s)
Fukumoto, Y., Kuki, K., Morii, M., Miura, T., Honda, T., Ishibashi, K., Hasegawa, H., Kubota, S., Ide, Y., Yamaguchi, N.-t., Nakayama, Y., and Yamaguchi, N.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun.
Volume: 452
Issue: 3
Pages: 542-547
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] v-Src inhibits the interaction between Rad17 and Rad9 and induces replication fork collapse.2014
Author(s)
Fukumoto, Y., Miura, T., Morii, M., Kubota, S., Honda, T., Kubota, S.-i., Morinaga, T., Yamaguchi, N.-t., Nakayama, Y., and Yamaguchi, N.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun.
Volume: 450
Issue: 1
Pages: 885-890
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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