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クライオ電子線トモグラフィー法によるモータータンパク質運動メカニズム解明

Research Project

Project/Area Number 14J06623
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Structural biochemistry
Research InstitutionKyushu Institute of Technology

Principal Investigator

荒牧 慎二  九州工業大学, 大学院情報工学府, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2014-04-25 – 2016-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2015: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywords生物物理 / 構造生物学 / 電子顕微鏡 / 糸状仮足 / アクチンフィラメント / ファシン / フィロポディア / モータータンパク質 / 生物物理学
Outline of Annual Research Achievements

本研究では,液体窒素温度(-196℃)で試料を観察することができる電子顕微鏡(クライオ電子顕微鏡)を用いて,神経細胞内のタンパク質構造を明らかにしようとした.特に,X線CT等と基本原理を同じとする,クライオ電子線トモグラフィ法を用いた.生体を構成する生体分子(タンパク質)の形(構造)と役割(機能)は密接な関係にあり,タンパク質の構造を明らかにすることは,生命を理解する上で重要である.ここでは,神経細胞の糸状仮足(フィロポディア)と呼ばれる構造に注目し,この内部構造の詳細を明らかにしようと試みた.糸状仮足は,細胞運動,細胞分裂,がん細胞の浸潤など,多様で,重要な細胞メカニズムに関与しているにもかかわらず,その機能メカニズムは,十分に解明されていない.
今回,電子顕微鏡を用いて,神経細胞の糸状仮足を高い分解能で三次元構造へと再構成することに成功した.これにより,糸状仮足の主要な構成タンパク質である,アクチンフィラメントが,ファシンと呼ばれる束化タンパク質により,束ねられている構造を高い分解能で得た.さらに,この構造から,この二つのタンパク質が相互作用することにより引き起こす構造変化を観測した.また,糸状仮足内でアクチンフィラメントはファシンにより,高い規則性を持って結合しており,非常に綺麗な六方格子状構造を作り出す.私は,電子顕微鏡を用いて得られた高分解能構造を用いて,このアーキテクチャを明らかにした.最終的に,これら二つのタンパク質による,糸状仮足の成長メカニズムを提唱するに至った.
本研究により得られた技術・知識を基に,今後は神経細胞内における,細胞内物資輸送タンパク質に注目し,その構造を明らかにすることで,生命メカニズムのさらなる深淵へと迫る.

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2016 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Revealing the intracellular ultrastructure of filopodia with cryo-electron tomography.2014

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Journal Title

      Microscopy (Oxf) Suppl.

      Volume: 63 Issue: suppl 1 Pages: 133-134

    • DOI

      10.1093/jmicro/dfu071

    • Related Report
      2014 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Actin Filaments Bundling Mechanisms by Fascin in Filopodia were Revealed with Cryo-ET.2016

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Organizer
      Biophysical Society 60th Annual Meeting
    • Place of Presentation
      Los Angeles Convention Center, ロサンゼルス,カリフォルニア州,アメリカ合衆国
    • Year and Date
      2016-02-27
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] クライオ電子線トモグラフィ法を用いた神経細胞フィロポディア内アクチンフィラメント束化メカニズムの解明2015

    • Author(s)
      荒牧 慎二,真柳 浩太,青山 一弘,安永 卓生
    • Organizer
      第57回日本顕微鏡学会九州支部総会・学術講演会
    • Place of Presentation
      九州大学 筑紫キャンパス
    • Year and Date
      2015-11-21
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] クライオ電子線トモグラフィは細胞内タンパク質複合体構造解析に有力な手法である2015

    • Author(s)
      荒牧 慎二,真柳 浩太,青山 一弘,安永 卓生
    • Organizer
      第53回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      金沢大学 角間キャンパス
    • Year and Date
      2015-09-13
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] クライオ電子線トモグラフィ法を用いた細胞内 F-actin 束化メカニズムの解明2015

    • Author(s)
      荒牧 慎二,真柳 浩太,青山 一弘,安永 卓生
    • Organizer
      日本顕微鏡学会 第71回学術講演会
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館
    • Year and Date
      2015-05-13
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] The ultrastructure of filopodia were observed with cryo-ET2014

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Organizer
      第52回生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター
    • Year and Date
      2014-09-25 – 2014-09-27
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] Observation of intracellular complexes of filopodia at molecular resolution with cryo-ET2014

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Organizer
      International Microscopy Congress 2014
    • Place of Presentation
      チェコ共和国 プラハ
    • Year and Date
      2014-08-07 – 2014-08-12
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] The intracellular architectures of filopodia were observed by cryo-ET at molecular resolution.2014

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Organizer
      International Biophysics Congress 2014
    • Place of Presentation
      オーストラリア ブリスベン
    • Year and Date
      2014-07-03 – 2014-07-07
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] Observation of intracellular molecules filopodia with cryo-ET.2014

    • Author(s)
      Shinji Aramaki, Kouta Mayanagi, Kazuhiro Aoyama and Takuo Yasunaga
    • Organizer
      International Symposium on Mechanobiology
    • Place of Presentation
      岡山大学医学部
    • Year and Date
      2014-05-20 – 2014-05-23
    • Related Report
      2014 Annual Research Report

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Published: 2015-01-22   Modified: 2024-03-26  

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