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ヌンチャク型人工蛋白質を利用した自己組織化ナノブロックの開発とナノ構造空間の創製

Research Project

Project/Area Number 14J10185
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Nanostructural chemistry
Research InstitutionShinshu University

Principal Investigator

小林 直也  信州大学, 総合工学系研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2014-04-25 – 2016-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2015: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Keywords自己組織化 / 人工蛋白質 / 蛋白質ナノブロック / 超分子 / ナノテクノロジー / 合成生物学 / 立体構造解析 / 蛋白質複合体 / 蛋白質デザイン
Outline of Annual Research Achievements

交付申請書に記載した①「頂点と3辺をつくるナノブロック」としてWA20-foldonを創出し、このタンパク質を大腸菌で発現させたところ、可溶性タンパク質として複数のタンパク質複合体の創出に成功した。さらにそれらのタンパク質複合体について交付申請書に記載した②「ナノ構造空間の創製および構造解析」として、ゲルろ過クロマトグラフィー-多角度光散乱(SEC-MALS)、超遠心分析、小角X線散乱(SAXS)等の実験を行い、6の倍数量体の複合体を規則的に形成することを明らかにした。さらに、複合体の溶液中での形状を評価するためにSAXSデータに基づいて剛体モデリング解析を行ったところ、6量体と12量体は、樽型構造と正四面体型構造をそれぞれ形成していることが強く示唆された。この成果は2015年にJournal of the American Chemical Society誌に発表し、表紙掲載及びJACS Spotlightsに選定・紹介記事が掲載された。
さらに、交付申請書に記載した③ 「辺を延長するナノブロック」として人工タンパク質WA20を直列に2個連結した「タンデムWA20ナノブロック」を開発した。ゲルろ過クロマトグラフィー-多角度光散乱(SEC-MALS)、小角X線散乱(SAXS)、分子モデリング解析を行い、このタンデムWA20ナノブロックが環状の自己組織化多量体構造を形成することや、複数種類の人工タンパク質ナノブロックの再構成により環状から直鎖状構造へのフォーム変換が可能であることを明らかにした。さらに、この直鎖状構造体を雲母基板上で巨大超分子ナノ構造体へと自己組織化させ、原子間力顕微鏡による観察に成功した。この成果は、現在、論文投稿準備中である。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Annual Research Report
  • Research Products

    (30 results)

All 2016 2015 2014 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results) Presentation (23 results) (of which Invited: 7 results) Remarks (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Int'l Joint Research] プリンストン大学(米国)

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      Volume: 73 Pages: 30-31

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      小林直也,新井亮一
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      日本生物工学会誌

      Volume: 94

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    • Author(s)
      Kobayashi N, Yanase K, Sato T, Unzai S, Hecht MH, Arai R.
    • Journal Title

      J Am Chem Soc.

      Volume: 137 Issue: 35 Pages: 11285-11293

    • DOI

      10.1021/jacs.5b03593

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    • Author(s)
      小林直也
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      第16回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡県・福岡市)
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      2016-03-30
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      小林直也
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      2015-10-26
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      名古屋大学(愛知県・名古屋市)
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      2015-09-04
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      小林直也,新井亮一
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      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
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      2015-06-24
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  • [Presentation] ドメインスワップ人工蛋白質タンデムWA20による自己組織的ナノ構造複合体の創製と解析2015

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      稲野紘一, 小林直也, 古賀(巽)理恵, 古賀信康, Michael. H. Hecht, 佐藤高彰, 新井亮一
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      第15回日本蛋白質科学会年会
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      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
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      信州大学農学部(長野県上伊那郡南箕輪)
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      2014-12-17
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      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2014-11-25 – 2014-11-27
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      「細胞を創る」研究会 7.0
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      東京大学弥生キャンパス 弥生講堂 一条ホール/アネックス(東京都文京区)
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      The International Symposium on Fiber Science and Technology 2014
    • Place of Presentation
      Big Sight Tokyo Fashion Town Hall(東京都江東区)
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      2014-09-28 – 2014-10-01
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    • Place of Presentation
      岡山大学 津島キャンパス(岡山県岡山市)
    • Year and Date
      2014-09-11 – 2014-09-13
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    • Place of Presentation
      ワークピア横浜/横浜産貿ホール マリネリア(神奈川県横浜市)
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      2014-06-25 – 2014-06-27
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  • [Remarks] 人工タンパク質ナノブロックにより自己組織化ナノ構造創出に成功

    • URL

      http://www.shinshu-u.ac.jp/institution/iccer/topics/iccer/post-21.html

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    • URL

      http://www.shinshu-u.ac.jp/faculty/textiles//news/2015/09/68838.html

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  • [Patent(Industrial Property Rights)] ドメインスワップ二量体人工タンパク質2015

    • Inventor(s)
      新井亮一,木村尚弥,小林直也
    • Industrial Property Rights Holder
      信州大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2015-103357
    • Filing Date
      2015-05-21
    • Related Report
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URL: 

Published: 2015-01-22   Modified: 2024-03-26  

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