肝内胆汁うっ滞症の創薬分子標的に資するユビキチンリガーゼの同定

• Project/Area Number: 14J12388
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Medical pharmacy
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 相田 健佑 東京大学, 特別研究員(DC2)
• Project Period (FY): 2014-04-25 – 2016-03-31
• Project Status: Declined (Fiscal Year 2015)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 2015: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2014: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: トランスポーター

Outline of Annual Research Achievements

Multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2)は、Bile salt export pump (BSEP)と同様に、肝細胞において主に毛細胆管側膜(canalicular membrane: CM)上に発現し、細胞内から胆汁中への胆汁酸、有機アニオンの排泄を担うABCトランスポーター(TP)であり、その機能低下は肝内胆汁うっ滞を惹起する。
MRP2発現293細胞の粗膜分画からMRP2抗体を用いて調製した免疫沈降物中において、MRP2のUb化が確認された。MRP2 293細胞の細胞膜タンパク質を細胞膜非透過性のEZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotinを用いて標識し(biotin標識)、細胞膜上MRP2の分解速度を測定したところ、C末端のグリシン残基を欠失したUbのドミナントネガティブ体(UbΔGG)を発現させることにより顕著な低下が認められた。また、MRP2の内在化速度に関しては、UbΔGGの発現による有意な変化は認められなかったものの、内在化したMRP2の分解速度を測定したところ、UbΔGGの強制発現によって、内在化したMRP2の分解速度は顕著に低下した。以上の結果からMRP2のUb化はMRP2の内在化後の分解シグナルとして働くことが示唆された。

Research Progress Status

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。