p53コアクチベーターINGファミリーのがん細胞中における変異および機能の解析

Research Project

Project/Area Number	15024263
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Toho University
Principal Investigator	長島誠東邦大学, 医学部, 助手 (80349901)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小林芳郎東邦大学, 理学部, 教授 (10134610)
Project Period (FY)	2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000) Fiscal Year 2003: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Keywords	p33ING2 / p53 / p47ING3 / p29ING4 / p28ING5
Research Abstract	p33ING1遺伝子のcDNA配列を用いたホモロジーサーチによって、複数のINGファミリー遺伝子(p33ING2、p47ING3、p29ING4、p28ING5)を単離・同定した。INGファミリーはC-末端領域にPHDフィンガー構造をもち、様々な遺伝子の発現を調節する転写因子のコアクチベーターと考えられた。 p47ING3は染色体7q31.3に位置し、12個のエクソンによって構成され、418個のアミノ酸をコードする。p47ING3タンパク質の発現レベルは、様々ながん細胞株において異なり、一部のがん細胞株ではp47ING3が失活していることが示唆された。p47ING3の過剰発現は、野生型のp53に依存して細胞増殖を負に制御し、細胞周期を停止させ、アポトーシスを誘導することが明らかになった。さらに、p53の下流に位置するp21/waf1やbax遺伝子のプロモーター活性を上昇させることも示された。 p29ING4とp28ING5は各々、249個と240個のアミノ酸をコードし、極めて相同性の高いINGファミリーである。他のINGファミリー同様に、p29ING4とp28ING5の過剰発現は、p53依存性に細胞増殖を抑制し、細胞周期を停止させ、アポトーシスを誘導した。p29ING4とp28ING5は、p21/waf1遺伝子のプロモーター活性を上昇させ、p21/waf1タンパク質の発現を誘導することも確認された。さらに、p29ING4とp28ING5は細胞中でヒストンアセチル化酵素(HAT)のp300タンパク質と相互作用を認め、p53のC-末端領域コドン382のリシンをアセチル化することが証明された。各INGファミリー遺伝子のエクソン・イントロン境界領域の塩基配列はすでに決定した。現在、様々ながん細胞株から抽出したDNAを用いて、INGファミリー遺伝子の変異の有無を解析中である。