リンパ系前駆細胞の生成過程におけるIL-7レセプターの機能
| Project/Area Number |
15039218
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Review Section |
Biological Sciences
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
生田 宏一 京都大学, ウイルス研究所, 教授 (90193177)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
真木 一茂 京都大学, ウイルス研究所, 講師 (10311424)
上田 正道 京都大学, ウイルス研究所, 助手 (50115797)
李 海天 京都大学, ウイルス研究所, 外国人特別研究員
|
|---|
| Project Period (FY) |
2003 – 2004
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2004)
|
| Budget Amount *help |
¥5,000,000 (Direct Cost: ¥5,000,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 2003: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
|
|---|
| Keywords | サイトカインレセプター / インターロイキン7 / T細胞 / T細胞抗原受容体 / 転写 / グルココルチコイド |
|---|
| Research Abstract |
リンパ系前駆細胞の生成過程におけるIL-7Rの機能を明らかにするために、IL-7Rの発現制御機構を解析した。まず、マウスIL-7Rα鎖遺伝子のプロモーター領域を解析した。まず、翻訳開始点の上流46bpから130bpの問の複数の箇所から、転写が開始することを確認した。マウスとヒトの配列を比較すると、転写開始点の上流200bpの領域が高度に保存されており、造血細胞やリンパ系前駆細胞の発生に重要な働きをしているIkaros、PU.1、Runxの結合モチーフが存在した。さらに、プロモーターの上流約3.6kbに高度に保存された270bpの領域が存在し、この中にグルココルチコイド受容体(GR)の結合モチーフがあった。
次に、レポーター法により転写活性化能を解析した。プロモーター領域をレポーター遺伝子に連結し未熟T細胞株KKFに導入すると、特異的な転写が検出された。この時、PU.1モチーフを破壊すると90%、Runxモチーフを破壊すると30%の活性が失われた。さらに、GRモチーフを含む上流領域を加えると、グルココルチコイドによる転写の増幅が見られ、GRモチーフを破壊したものでは増幅が消失した。また、グルココルチコイド刺激によりGRがモチーフに結合することを、ゲルシフト法とクロマチン免疫沈降法により確認した。
以上の結果から、IL-7Rα鎖遺伝子のプロモーター活性において、PU.1とRunxのモチーフが重要な働きをしていることが明らかとなった。さらに、GRが、上流に存在するグルココルチコイド応答性領域に結合し、プロモーターからの転写を増幅することが示された。
|
Report
(2 results)
Research Products
(4 results)
