グリア細胞における化学伝達物質およびそのレセプターの制御機構の解明

• Project/Area Number: 15082206
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 高橋 正身 Kitasato University, 医学部, 教授 (10318826)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 東 貞宏 北里大学, 医学部, 助教 (80348507) ; 板倉 誠 北里大学, 医学部, 講師 (30398581) ; 阿部 輝雄 新潟大学, 脳研, 准教授 (50010103) ; 片岡 正和 信州大学, 工学部, 准教授 (90332676) ; 高垣 洋太郎 北里大学, 医学部, 教授 (50281324)
• Project Period (FY): 2003 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥61,400,000 (Direct Cost: ¥61,400,000); Fiscal Year 2007: ¥10,700,000 (Direct Cost: ¥10,700,000); Fiscal Year 2006: ¥11,500,000 (Direct Cost: ¥11,500,000); Fiscal Year 2005: ¥12,800,000 (Direct Cost: ¥12,800,000); Fiscal Year 2004: ¥12,800,000 (Direct Cost: ¥12,800,000); Fiscal Year 2003: ¥13,600,000 (Direct Cost: ¥13,600,000)
• Keywords: グリア細胞 / 化学伝達物質 / 神経伝達物質 / 開口放出 / SNAREタンパク質 / アストロサイト / リン酸化 / キナーゼ / レセプター

Research Abstract

脳が機械的損傷やウイルス感染などを受けると活性化アストロサイトが出現するが、その活性化機構や機能的な役割はまだよく分かっていない。 昨年度までの報告で、我々が作成した、SNAP-25変異マウスの脳で、生後10週齢頃から抗GFAP抗体で強染色される活性化アストロサイトが、大脳皮質や海馬を中心に出現することを見いだした。本年度はSNAP-25変異マウスの脳で見られる活性化アストロサイトの性質を明らかにするため、様々な抗体を用いて免疫組繊化学解析を行った。イムノプロット解析から変異マウスの脳ではBDNF発現も上昇することが明らかとなったため、抗BDNF抗体を用いて免疫組繊化学解析を行ったところ、活性化アストロサイトに強い陽性反応を見いだした。さらに様々な抗体を用いて網羅的染色を行った結果、GDNFやSynaptogyrinに対しても陽性反応を示すことが明らかとなった。興味深いことにBDNF陽性の活性化アストロサイトは海馬や大脳皮質に存在しているのに対し、Synaptogyrin陽性細胞は海馬に、GDNF陽性細胞は海馬歯状回に限定して見いだされた。これらの結果からアストロサイトには、活性化の度合いや機能の違いによる多様性が存在することが考えられた。さらに活性化アストロサイトからの神経栄養因子の分泌機構を明らかにするため、ラット由来のグリオーマ細胞にBDNFを発現させたところ、細胞内顆粒に貯蔵され、Ca2+依存的な機構で放出されることが明らかとなった。

Research Products

• [Journal Article] Phosphorylation of adult type Sept5 (CDCrel-1) by cyclin-dependent kinase 5 inhibits interaction with syntaxin-1. (2007)
  • Author(s): Taniguchi M
  • Journal Title: J Biol Chem 282 Pages: 7869-7876
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Phosphomimetic mutation of Ser-187 of SNAP-25 increases both syntaxin binding and highly Ca^<2+> sensitive exocytosis. (2007)
  • Author(s): Yang Y
  • Journal Title: J Gen Physiol 129 Pages: 233-244
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] RIM1 confers sustained activity and neurotransmitter vesicle anchoring to presynaptic Ca^<2+> channels. (2007)
  • Author(s): Kiyonaka S
  • Journal Title: Nat. Neurosci 10 Pages: 691-701
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Activity-dependent phosphorylation of Ser187 is required for SNAP-25-negative modulation of neuronal voltage-gated calcium channels. (2007)
  • Author(s): Pozzi D
  • Journal Title: Proc Natl Acad Sci U S A 105 Pages: 323-328
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Phosphorylation of SNAP-25 at Ser187 mediates enhancement of exocytosis by a phorbol ester in INS-1 cells. (2007)
  • Author(s): Shu Y
  • Journal Title: J Neurosci 28 Pages: 21-30
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dual regulation of astrocyte gap junction hemichannels by growth factors and a pro-inflammatory cytokine via the mitogen-activated protein kinase cascade. (2007)
  • Author(s): Mitsuhiro Morita
  • Journal Title: Glia 55 Pages: 508-515
• [Journal Article] Differential localization and regulation of stargazin-like protein, γ-8 and stargazin in the plasma membrane of hip pocampal and cortical neurons. (2006)
  • Author(s): Mihoko Inamura
  • Journal Title: Neurosci. Res. 55 Pages: 45-53
• [Journal Article] Differential distributions of the Ca^<2+>-dependent activator protein for secretion family proteins (CAPS2 and CAPS1) in the mouse brain. (2006)
  • Author(s): Tetsushi Sadataka
  • Journal Title: Comp Neurol. 495 Pages: 735-753
• [Journal Article] Enhanced activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II upon downregulation of cyclin-dependent kinase 5-p35. (2006)
  • Author(s): Tomohisa Hosokawa
  • Journal Title: J. Neurosci. Res. 84 Pages: 747-754
• [Journal Article] Development- and activity-dependent regulation of SNAP-2 5 phosphorylation in rat brain. (2006)
  • Author(s): Masakazu Kataoka
  • Journal Title: Neurosci. Lett. 407 Pages: 258-262
• [Journal Article] Ca^<2+> channel activating action of maitotoxin in cultured brainstem neurons. (2006)
  • Author(s): Atsushi Kakizaki
  • Journal Title: Eur. J. Pharmcol. 536 Pages: 223-231
• [Journal Article] Ca^<2+>-calmodulin-dependent myosin light chain kinaseis essential for activation of TRPC5 channels expressed in HEK293 cells. (2006)
  • Author(s): Shunichi Shimizu
  • Journal Title: J.Physiol. 570.2 Pages: 219-235
• [Journal Article] Differential Localization of SHPS-1 and CD47 and Its Molecular Mechanism in Cultured Hippocampal Neurons. (2005)
  • Author(s): Hiroshi Ohnishi
  • Journal Title: J.Neuroscience 25 Pages: 2702-2711
• [Journal Article] Negative regulation of neurotransmitter release by calpain : A possible involvement of specific SNAP-25 cleavage. (2005)
  • Author(s): Kosuke Ando
  • Journal Title: J.Neurochemistry 94 Pages: 651-658
• [Journal Article] Two Distinct Regulatory Mechanisms of Neurotransmitter Release by Phosphatidylinositol 3-kinase. (2005)
  • Author(s): Makoto Itakura
  • Journal Title: J.Neurochemistry 94 Pages: 502-509
• [Journal Article] The activation of exocytotic sites by the formation of phosphatidyl inositol-4,5-bisphosphate microdomains at syntaxin clusters. (2005)
  • Author(s): Kyota Aoyagi
  • Journal Title: J.Biol.Chem. 280 Pages: 17346-17352
• [Journal Article] Role of VAMP-2,VAMP-7,and VAMP-8 in constitutive exocytosis from HSY cells. (2005)
  • Author(s): Yohei Oishi
  • Journal Title: Histochem.Cell Biol. 30 Pages: 1-9
• [Journal Article] Negative regulation of neurotransmitter release by calpain : A possible involvement of specific SNAP-25 cleavage. (2005)
  • Author(s): Kosuke Ando
  • Journal Title: J.Neurochemistry (印刷中)
• [Journal Article] Two Distinct Regulatory Mechanisms of Neurotransmitter Release by Phosphatidylinositol 3-kinase. (2005)
  • Author(s): Makoto Itakura
  • Journal Title: J.Neurochemistry (印刷中)
• [Journal Article] Differential Localization of SHPS-1 and CD47 and Its Molecular Mechanism in Cultured Hippocampal Neurons.J.Neurosci. (2005)
  • Author(s): Hiroshi Ohnishi
  • Journal Title: J.Neuroscience (印刷中)
• [Journal Article] Quantal size of catecholamine release from rat chromaffin cells is regulated by tonic activity of protein kinase A. (2004)
  • Author(s): Takeshi Koga
  • Journal Title: Neuroscience Letter 360 Pages: 145-148
• [Presentation] 毒素が拓いた情動異常の研究 (2007)
  • Author(s): KKRホテル(熱海)
  • Organizer: 第54回毒素シンポジウム
  • Place of Presentation: 犬鳴グランドホテル
  • Year and Date: 2007-09-06
• [Presentation] ミュータントマウスを用いたグリア細胞の活性化機構の解析 (2007)
  • Author(s): 高橋 正身
  • Organizer: 「神経-グリア回路網」サマーワークショップ
  • Place of Presentation: KKRホテル(熱海)
  • Year and Date: 2007-07-09
• [Book] 遺伝子制御による「選択的シナプス強化・除去」機構の解明 (2005)
  • Author(s): 板倉 誠
  • Total Pages: 202
  • Publisher: クバプロ
• [Publications] Masami Takahashi: "New aspects of neurotransmitter release and exocytosis : Regulation of neurotransmitter release by phosphorylation."J.Pharmacolo.Sci.. 93. 41-45 (2003)
• [Publications] 板倉 誠: "神経伝達物質の放出機構"実験医学増刊 脳・神経研究2004. 21. 2357-2360 (2003)