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B型肝炎ウイルスが発現するアンチセンスRNAおよびそのプロモーターの機能解析

Research Project

Project/Area Number 15659112
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Virology
Research InstitutionFukuoka Dental College

Principal Investigator

森山 耕成  福岡歯科大学, 歯学部, 講師 (10265275)

Project Period (FY) 2003 – 2004
Project Status Completed (Fiscal Year 2004)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2004: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
KeywordsB型肝炎ウイルス / アンチセンスRNA / RNAポリメラーゼ-III / Dicer / ORF6
Research Abstract

B型肝炎患者の非癌部肝組織においてpreC-Cプロモーターから転写されるアンチセンスRNA (C-asRNA)を見い出した.5'RACEによる解析では,大部分はポジション1655から転写が開始され,約700bp下流のTTTT配列で終結していた.転写開始点の22bp上流に点突然変異をもりウイルスでは,その開始点が上流に移動していた.よって,C-asRNAはRNAポリメラーゼIIIにより転写されていることが示唆された.スプライシングを受けた分子は存在せず,量はセンスRNAの0.05-0.4%であった.C-asRNAにあるORF6は開始コドンを欠くものがあったので,ORF6蛋白はウイルス増殖に必須ではないと考えられる(J.Gen.Virol.84:1907-1913,2003).幾種類かのNorthen blotを試みたが,dicer消化によって生じうるHBV-RNAの21nt断片は検出できなかった.
潜伏感染状態で多くのC-asRNAが発現するのかどうか検討したが,HBs抗体陽性の既感染者には検出できなかった.一方,持続感染(慢性肝炎)ではC mRNAの少ない者ほどC-asRNAが多い傾向が認められた(投稿中).
ポジション2505付近でpolyA付加される第2のアンチセンスRNAを見いだした.その開始点は,ポジション2700前後であった.すなわち,preSプロモーターからの0.7-kbにおよぶ長いアンチセンスRNAではなかった.preSプロモーターから転写される第3のアンチセンスRNAを見い出し,PreS領域のlucアッセイで弱いアンチセンス転写活性を確認した.しかし,転写は下流の至るところで中断していたので,core mRNAなどのセンス方向の転写により阻害されていること,および,RNAポリメラーゼIIによって転写されていることが示唆された(投稿中).

Report

(2 results)
  • 2004 Annual Research Report
  • 2003 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2003

All Journal Article (2 results)

  • [Journal Article] Antisense RNAs transcribed from the upstream region of the precore/core promoter of hepatitis B virus.2003

    • Author(s)
      Moriyama K, Hayashida K, Shimada M, Nakano S, Nakashima Y, Fukumaki Y.
    • Journal Title

      Journal of General Virology 84・7

      Pages: 1907-1913

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Antisense RNAs transcribed from the upstream region of the precore/core promoter of hepatitis B virus.2003

    • Author(s)
      Moriyama K, Hayashida K, Shimada M, Nakano S, Nakashima Y, Fukumaki Y
    • Journal Title

      Journal of General Virology 84・7

      Pages: 1907-1913

    • Related Report
      2003 Annual Research Report

URL: 

Published: 2003-04-01   Modified: 2016-04-21  

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