炎症性腸疾患モデルマウス(サイトカインγ鎖欠損)を用いた腸炎の免疫学的解析

• Project/Area Number: 15659296
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General surgery
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 中田 精三 大阪大学, 医学部附属病院, 助教授 (50116068)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 伊藤 壽記 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座教授 (20231152)
• Project Period (FY): 2003 – 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000); Fiscal Year 2004: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2003: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
• Keywords: γ_c^<- / Y>マウス / colitis / CD4^+T細胞 / IL-6 / IBD / IL-2Rγchain欠損マウス / Th2 / CD4+Tcell / TCRVβ14

Research Abstract

〔実験1〕【対象・方法】colitisを発症した生後12週齢のγ_c^<-/Y>マウスを用い,colitisを発症していない生後6週齢のγ_c^<-/Y>マウスを対照として,組織学的検討,大腸lamina propria lymphocyte (C-LPL)におけるcell populationの解析,ELISA法によるC-LPLにおけるサイトカイン産生の解析,細胞内サイトカインFACSによるサイトカイン産生の解析を行った.【結果】colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスでは対照マウスに比し,crypt depthの伸長,Goblet cellの減少,粘膜下層における炎症性細胞浸潤がより顕著に認められた.C-LPLにおけるcell populationの解析では有意なCD4^+T細胞の増加を認めた.C-LPLにおけるサイトカイン産生ではIL-6の無刺激下での産生を有意に認めた.細胞内サイトカインFACSではCD4^+T細胞のIL-6産生を認めた.
〔実験II〕【対象・方法】colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスでは,病態形成によってIL-6を産生するCD4^+T細胞の関与が示唆されたため,以下の実験にてその検討を行った.colitis未発症の生後8週例のγe^<-/Y>マウスに抗IL-6 receptor(IL-6R)モノクローナル抗体を投与し,colitis発症が抑制されるかをisotype control抗体を投与した群を対照として比較検討した.colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスよりCD4^+T細胞を分離しC, B,17 SCIDマウスの腹腔内に移入,colitis発症が認められるか否かをγ_c^<-/Y>マウスより分離した細胞を移入した群と比較検討した.【結果】抗IL-6R抗体を投与されたγ_c^<-/Y>マウスはisotype control抗体を投与された対照群に比し,炎症は軽度にとどまっており,抗IL-6R抗体を投与することにより,colitis発症が抑制された.Colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスよりCD4^+T細胞を移入したSCIDマウスには,対照群に比し,炎症は高度で,病態形成性CD4^+T細胞を移入することによりSCIDマウスにcolitis発症が認められた.
【結語】
γ_c^<-/Y> mouseにおけるcolitis発症の病態形成にはIL-6を発症するCD4^+T細胞が関与していた.

Research Products

• [Journal Article] COLITIS IN MICE LACKING THE COMMON CYTOKINE RECEPTOR γ CHAIN IS MEDIATED BY IL-6-PRODUCING CD4^+ T CELLS
  • Author(s): Yasuyuki Kai, et al.
  • Journal Title: Gestroenterology (In press)
• [Publications] Mizushima T., Ito T., Nezu R., Kishi D., Kai Y., Tamagawa H., Kiyono H., Matsuda H.: "Therapeutic Effects of a New Lymphocyte Homing Agent FTY720 in Interleukin-10 Gene Deficient Mice with Colitis."Inflammatory Bowel Diseases. 発表予定. (2004)
• [Publications] 水島恒和, 井上善文, 伊藤壽記, 打越史洋, 松田 暉: "腸回転異常症を伴ったクローン病に対する腹腔鏡補助下手術の1例"日本外科系連合学会誌. 28(6). 1024-1028 (2003)
• [Publications] Tamagawa H., Tshukita S., Ito T., Matsuda H., Kiyono H.: "Characteristics of claudin expression in follicle-associated epithelium of Peyer's patches ; Preferential localization of Claudin-4 at the apex of the dome region"Laboratory Investigation. 83(7). 1045-1053 (2003)
• [Publications] 玉川浩司, 伊藤壽記, 松田 暉: "Bacterial translocationにおける樹状細胞とtight junctionの関与"消化器科. 37(1). 7-13 (2003)
• [Publications] 伊藤壽記, 水島恒和: "FTY720の新しい作用機序"日本臓器保存生物医学会. 10(4). 281-293 (2003)