膵島移植における分離膵島の二層法による機能回復に関する研究

• Project/Area Number: 15659313
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 黒田 嘉和 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70178143)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鈴木 康之 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40304092) ; 谷岡 康喜 神戸大学, 大学院・医学系研究科, COE研究員 (00372649)
• Project Period (FY): 2003 – 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2004: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2003: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
• Keywords: 膵島移植 / 二層法 / 膵島培養 / 膵島障害

Research Abstract

膵島移植において、膵島分離後24〜48時間の培養(例えばRPMI,37℃で培養)を行ったのちに移植することを推奨する報告が多い。我々はこの移植前の膵島に対する培養に二層法を組み合わせ、成績向上を目指した。Wister ratの膵島を分離後、種々の条件で24時間の培養あるいは保存を行い、膵島のviability評価をin vitroで行った。1群:培養・保存なし(control)、2群:RPMI,37℃で培養、3群:二層法(RPMI/PFC)37℃で培養、4群:二層法(RPMI/PFC)4℃で培養、5群:UW,4℃で保存、6群:二層法(UW/PFC)、4℃で保存。Stimulation Indicesはそれぞれ1.3,2.6,3.7,1.2,1.4,2.4で2、3、6群ではインスリン刺激に対する膵島の反応性が良好であった。これら3群における膵島をFDA/PI染色でそのviabilityを比較した結果、2、3、6群でそれぞれ88%,92%,76%で、有意差を認めないものの、二層法(RPMI/PFC)37℃が最も良好な結果を示した。以上より、分離膵島の培養に二層法を応用する手法の有用性を証明した(Hepato-Gastroenterol, in press)。

Research Products

• [Journal Article] Rescue purification maximized the use of human islet preparations for transplantation. (2005)
  • Author(s): Ichii H.
  • Journal Title: Am J Transplant 5・1 Pages: 21-30
• [Journal Article] Influence of pancreas preservation on human islet isolation outcomes : impact of the two-layer method (2004)
  • Author(s): Tsujimura T
  • Journal Title: Transplantation 78・1 Pages: 96-100
• [Journal Article] Short-term storage of the ischemically damaged human pancreas by the two-layer method prior to islet isolation (2004)
  • Author(s): Tsujimura T.
  • Journal Title: Cell Transplant 13・1 Pages: 67-73
• [Journal Article] Superiority of the two-layer method prior to islet isolation confirmed in vivo viability assessment.
  • Author(s): Kakinoki K.
  • Journal Title: Transplantation (未定)(in press)
• [Journal Article] Impact of the two-layer method on the quality of isolated pancreatic islets.
  • Author(s): Takahashi T.
  • Journal Title: Hepato-Gastroenterol (未定)(in press)
• [Publications] Matsuda T, Suzuki Y, Tanioka Y, Toyama H, kakinoki K, Hiraoka K, Fujino Y, Matsumoto S, Kuroda Y: "Pancreas preservation by the two-layer cold storage method before islet isolation protects isolated islets against apoptosis through the mitochondrial pathway"Surgery. 134・3. 437-445 (2003)
• [Publications] Takada M, Toyama H, Tanaka T, Suzuki Y, Kuroda Y.: "Augmentation of interleukin-10 expression in islets after brain death"Transplant Proc. (in press).
• [Publications] Toyama H, Takada M, Suiuki Y, Kuroda Y.: "Brain death induced expression of ICAM-1 and VCAM-1 on rat hepatocytes."Hepato-Gastroenterol. 50. 1854-1856 (2003)
• [Publications] Tsujimura T, Kuroda Y, Shapiro AMJ: "The influence of pancreas preservation on human islet isolation outcomes : Impact of the two-layer method"Transplantation. (in press).
• [Publications] Tsujimura T, Kuroda Y, Lakey JRT: "Short-term storage of the ischemically damaged human pancreas by the two-layer method prior to islet isolation"Cell Transplant. (in press).