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Elucidation of disease mechanisms and search for biomarkers by using enzymatic fluorometric assays for quantifying all phospholipids

Research Project

Project/Area Number 15H05660
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Laboratory medicine
Research InstitutionShiga University of Medical Science

Principal Investigator

Morita Shin-ya  滋賀医科大学, 医学部, 准教授 (20449870)

Research Collaborator Tsuji Tokuji  
Project Period (FY) 2015-04-01 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥23,920,000 (Direct Cost: ¥18,400,000、Indirect Cost: ¥5,520,000)
Fiscal Year 2018: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2017: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2016: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2015: ¥6,370,000 (Direct Cost: ¥4,900,000、Indirect Cost: ¥1,470,000)
Keywordsリン脂質 / 酵素蛍光定量法 / ホスファチジルイノシトール / ホスファチジルグリセロール / カルジオリピン / 細胞密度 / 脂質 / 酵素 / バイオテクノロジー / バイオマーカー
Outline of Final Research Achievements

Phospholipids are the main constituents of cell membranes and plasma lipoproteins. Based on structures, phospholipids are classified into classes such as phosphatidylcholine (PC) and phosphatidylinositol (PI). However, there has been no highly sensitive and high-throughput method for measuring phospholipids. In this study, in addition to our previously developed assays, we developed the enzymatic fluorometric assays for quantifying all major phospholipid classes. Furthermore, by using these enzymatic fluorometric assays for measurements of all major phospholipid classes, we evaluated in detail the effects of cell density of enzyme expression on phospholipid compositions in cultured cells. We also elucidated the mechanism of biliary phospholipid secretion.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

従来、リン脂質の定量は、TLC/リン定量法などにより行われてきたが、微量の生体試料に含まれているリン脂質をクラスごとに定量解析するには十分でなかった。そこで、これまでに研究代表者はリン脂質クラスのうちPA・PC・PE・PS・SMに対する酵素蛍光定量法を確立していた。本研究では、PIとPG・CLの酵素蛍光定量法の開発に成功した。これにより、主要な全リン脂質クラスに対する高感度・高精度かつハイスループットな網羅的一斉定量法がついに完成した。本定量法は、培養細胞実験に加えて動物実験や植物・微生物実験を含む生命科学研究全般ならびにバイオマーカー探索等の臨床研究に活用されることが期待できる。

Report

(5 results)
  • 2018 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2017 Annual Research Report
  • 2016 Annual Research Report
  • 2015 Annual Research Report
  • Research Products

    (55 results)

All 2019 2018 2017 2016 2015 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 4 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (43 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 8 results) Remarks (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (4 results) (of which Overseas: 3 results)

  • [Journal Article] Molecular Mechanisms for Protection of Hepatocytes against Bile Salt Cytotoxicity2019

    • Author(s)
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tokuji Tsuji, Tomohiro Terada
    • Journal Title

      Chemical and Pharmaceutical Bulletin

      Volume: 67 Issue: 4 Pages: 333-340

    • DOI

      10.1248/cpb.c18-01029

    • NAID

      130007621742

    • ISSN
      0009-2363, 1347-5223
    • Year and Date
      2019-04-01
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  • [Journal Article] Effects of lipid composition on the structural properties of human serum amyloid A in reconstituted high-density lipoprotein particles2019

    • Author(s)
      Hiroka Takase, Masafumi Tanaka, Yuki Nakamura, Shin-ya Morita, Toshiyuki Yamada, Takahiro Mukai
    • Journal Title

      Chem. Phys. Lipids

      Volume: 221 Pages: 8-14

    • DOI

      10.1016/j.chemphyslip.2019.03.001

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Cholesterol attenuates cytoprotective effects of phosphatidylcholine against bile salts2017

    • Author(s)
      Yoshito Ikeda, Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • Journal Title

      Sci. Rep.

      Volume: 7 Issue: 1 Pages: 306-306

    • DOI

      10.1038/s41598-017-00476-2

    • NAID

      120006346599

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    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Quantitative Analysis of Cellular Phospholipid Metabolism by Enzymatic Fluorometric Assays2016

    • Author(s)
      森田真也
    • Journal Title

      MEMBRANE

      Volume: 41 Issue: 5 Pages: 202-208

    • DOI

      10.5360/membrane.41.202

    • NAID

      130005421183

    • ISSN
      0385-1036, 1884-6440
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  • [Journal Article] 網羅的全リン脂質酵素蛍光定量法の開発とバイオマーカー探索2016

    • Author(s)
      森田真也
    • Journal Title

      薬学研究の進歩

      Volume: 32 Pages: 115-120

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  • [Journal Article] Enzymatic measurement of phosphatidylglycerol and cardiolipin in cultured cells and mitochondria2015

    • Author(s)
      Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • Journal Title

      Sci. Rep.

      Volume: 5 Issue: 1 Pages: 11737-11737

    • DOI

      10.1038/srep11737

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  • [Presentation] 新規全リン脂質クラス酵素蛍光定量法の開発と生命科学・臨床研究への応用2019

    • Author(s)
      森田真也
    • Organizer
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  • [Presentation] 新規全主要リン脂質クラス酵素蛍光定量法の開発と臨床研究への応用2019

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      森田真也
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      日本薬学会第139年会
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  • [Presentation] Novel enzymatic fluorometric measurements of all major cellular phospholipid classes2018

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      Shin-ya Morita, Tokuji Tsuji, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
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      59th International Conference on the Bioscience of Lipids
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  • [Presentation] 主要リン脂質クラス一斉定量法の開発と応用2018

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      森田真也
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      第58回日本臨床化学会年次学術集会
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  • [Presentation] 主要リン脂質クラス一斉定量法の開発と基礎研究・臨床研究への応用2018

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      森田真也
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      第73回国立循環器病研究センター(NCVC)研究者交流会
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      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
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      日本膜学会第40年会
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  • [Presentation] タウロヒオデオキシコール酸によるABCB4リン脂質排出の促進2018

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      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
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      第60回日本脂質生化学会
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  • [Presentation] 酵素蛍光定量法を用いた細胞小器官における主要リン脂質組成の分析2018

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      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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      第60回日本脂質生化学会
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  • [Presentation] 全主要リン脂質クラスを網羅的に解析する酵素蛍光定量法の開発2018

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      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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      医療薬学フォーラム2018
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  • [Presentation] タウロヒオデオキシコール酸によるリン脂質排出トランスポーターABCB4の活性化2018

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      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
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      第13回トランスポーター研究会
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  • [Presentation] ABCB4によるリン脂質排出を強力に促進する分子の探索2018

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      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
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      第12回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
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  • [Presentation] 胆汁リン脂質促進作用による新規肝機能改善薬の探索2018

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      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
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      第28回日本医療薬学会年会
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  • [Presentation] 胆汁酸肝組織障害に対する新規治療薬開発を目指したリン脂質トランスポーターABCB4の機能解明2018

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      池田義人、森田真也、波多野亮、辻徳治、寺田智祐
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      第35回滋賀医科大学シンポジウム
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  • [Presentation] Enhancing effects of bile salts on ABCB4-mediated phospholipid efflux2018

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      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tokuji Tsuji, Tomohiro Terada
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      7th FEBS Special Meeting ABC Proteins
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  • [Presentation] ホスファチジルイノシトールに対する新規定量法の開発と細胞内全リン脂質クラスの定量的解析2018

    • Author(s)
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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      第8回学際的脂質創生研究部会講演会
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  • [Presentation] ホスファチジルイノシトール定量法の新規開発と細胞内主要リン脂質クラスの定量的解析2018

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      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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      日本農芸化学会2018年度大会
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  • [Presentation] ホスファチジルイノシトールに対する酵素蛍光定量法の開発と細胞内リン脂質クラスの網羅的定量2018

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      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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  • [Presentation] タウリン抱合型ヒオデオキシコール酸によるABCB4を介したリン脂質排出の促進2018

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      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
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      日本薬学会第138年会
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  • [Presentation] 胆汁酸に対するリン脂質の細胞保護作用のコレステロールによる低下2017

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      森田真也、池田義人、寺田智祐
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      医療薬学フォーラム2017
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  • [Presentation] リン脂質排出トランスポーターABCB4を活性化する胆汁酸の探索とメカニズムの解明2017

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      森田真也、池田義人、辻徳治、寺田智祐
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  • [Presentation] ホスファチジルイノシトール酵素蛍光定量法の開発によるリン脂質一斉定量法の完成2017

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      森田真也、辻徳治、池田義人、寺田智祐
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      膜シンポジウム2017
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  • [Presentation] 胆汁酸によるABCB4リン脂質排出の促進2017

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      森田真也、池田義人、辻徳治、寺田智祐
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      日本薬物動態学会第32回年会
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  • [Presentation] リン脂質が有する胆汁酸細胞毒性減弱作用に及ぼすコレステロールの影響2017

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      池田義人、森田真也、寺田智祐
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      日本膜学会第39年会
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  • [Presentation] 胆汁酸毒性に対するリン脂質の細胞保護作用に及ぼすコレステロールの影響2017

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      池田義人、森田真也、寺田智祐
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      第59回日本脂質生化学会
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  • [Presentation] ABCB4によるリン脂質排出を促進するアクセプター分子の探索2017

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      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
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      第12回トランスポーター研究会年会
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  • [Presentation] 毛細胆管膜トランスポーターABCB4によるリン脂質排出を促進する分子の探索2017

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      池田義人、森田真也、辻徳治、寺田智祐
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      第11回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
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  • [Presentation] 全主要リン脂質クラスを網羅的に解析する酵素蛍光定量法の開発2017

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      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
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  • [Presentation] ABCB4のリン脂質排出を促進する分子の探索2017

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      第39回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
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  • [Presentation] ホスファチジルイノシトール酵素蛍光定量法の開発と細胞内全リン脂質クラス組成に関する定量的解析2017

    • Author(s)
      辻徳治、森田真也、池田義人、寺田智祐
    • Organizer
      第39回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
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  • [Presentation] Novel enzymatic fluorometric assays for quantifying cellular phospholipid classes2016

    • Author(s)
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
    • Organizer
      12th International Congress of Cell Biology
    • Place of Presentation
      Prague, Czech Republic
    • Year and Date
      2016-07-21
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  • [Presentation] ウルソデオキシコール酸及びその抱合体によるABCB4を介したリン脂質排出の促進2016

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      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      第11回トランスポーター研究会年会
    • Place of Presentation
      宇治
    • Year and Date
      2016-07-02
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  • [Presentation] 胆汁酸細胞毒性に対するウルソデオキシコール酸の細胞保護作用2016

    • Author(s)
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      医療薬学フォーラム2016
    • Place of Presentation
      大津
    • Year and Date
      2016-06-25
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    • Invited
  • [Presentation] 胆汁酸とリン脂質の混合ミセル形成に及ぼすコレステロールの影響2016

    • Author(s)
      池田義人、森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      第58回日本脂質生化学会
    • Place of Presentation
      秋田
    • Year and Date
      2016-06-09
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  • [Presentation] 酵素蛍光定量法による細胞内リン脂質代謝機能解析2016

    • Author(s)
      森田真也
    • Organizer
      日本膜学会第38年会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2016-05-10
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    • Invited
  • [Presentation] 新規リン脂質酵素蛍光定量法を用いたミトコンドリア機能解析2015

    • Author(s)
      森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      第37回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
    • Place of Presentation
      熊本
    • Year and Date
      2015-11-19
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  • [Presentation] 新規リン脂質酵素蛍光定量法を用いたミトコンドリアPGS1機能解析2015

    • Author(s)
      森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      第9回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • Place of Presentation
      千葉
    • Year and Date
      2015-11-07
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  • [Presentation] New enzyme-based fluorometric assay for quantifying cardiolipin and phosphatidylglycerol in cells and mitochondria2015

    • Author(s)
      Shin-ya Morita, Tomohiro Terada
    • Organizer
      Cardiolipin as Key Lipid of Mitochondria in Health and Disease
    • Place of Presentation
      Florence, Italy
    • Year and Date
      2015-09-30
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  • [Presentation] Quantitative analysis of cellular phospholipid classes by using enzymatic fluorometric assays2015

    • Author(s)
      Shin-ya Morita, Yoshito Ikeda, Tomohiro Terada
    • Organizer
      13th Euro Fed Lipid Congress
    • Place of Presentation
      Florence, Italy
    • Year and Date
      2015-09-27
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  • [Presentation] リン脂質網羅的酵素蛍光定量法による細胞リン脂質代謝解析2015

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      森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      第10回トランスポーター研究会年会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-06-20
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      森田真也、寺田智祐
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      第57回日本脂質生化学会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-05-28
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  • [Presentation] 新規ホスファチジルグリセロール・カルジオリピン酵素蛍光定量法2015

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      森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      日本薬剤学会第30年会
    • Place of Presentation
      長崎
    • Year and Date
      2015-05-21
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      森田真也、寺田智祐
    • Organizer
      日本膜学会第37年会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-05-14
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  • [Presentation] リン脂質と疾患2015

    • Author(s)
      森田真也
    • Organizer
      神戸薬科大学特別研究セミナー
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-05-08
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  • [Remarks] 滋賀医科大学 医学部附属病院 薬剤部

    • URL

      http://www.sums-pharm.jp/

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  • [Remarks] 滋賀医科大学 医学部附属病院 薬剤部

    • URL

      http://www.sums-pharm.jp/

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    • Inventor(s)
      森田真也
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人 滋賀医科大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2018
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  • [Patent(Industrial Property Rights)] ホスファチジルイノシトールの定量方法及び定量用キット2017

    • Inventor(s)
      森田真也
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人 滋賀医科大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2017-103714
    • Filing Date
      2017
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] Method and kit for quantifying cardiolipin2016

    • Inventor(s)
      Shin-ya Morita
    • Industrial Property Rights Holder
      Shiga Univ. Med. Sci.
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2016
    • Acquisition Date
      2019
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Overseas
  • [Patent(Industrial Property Rights)] Method and kit for quantifying cardiolipin2016

    • Inventor(s)
      Shin-ya Morita
    • Industrial Property Rights Holder
      Shiga Univ. Med. Sci.
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2016-09-30
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Overseas

URL: 

Published: 2015-04-16   Modified: 2020-03-30  

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