胆管癌上皮間葉移行におけるTGF-β/miR-200ファミリーの直接交絡

• Project/Area Number: 15K10199
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 水口 義昭 日本医科大学, 医学部, 助教 (70409217)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2016)
• Budget Amount: ¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000); Fiscal Year 2017: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2016: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2015: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
• Keywords: TGF-beta1 / microRNA 200 family / EMT / TGF-bta1 / microRNA-200

Outline of Annual Research Achievements

昨年度はサイトカインTGFbeta1が胆管細胞癌培養株においてmicroRNA200 familyの発現増大を転写レベルで直接コントロールしていることを確認した。また、TGFbeta1の投与により、細胞増殖が促進されることをスクラッチアッセイにて確認した。
我々はこれらの結果に基づき、TGFbeta1とmicroRNA200 familyの直接がEMTを促進していることを証明するために、TGF-beta1/microRNA200がコントロールし得るターゲットタンパクとしてOcculdin WIPF1をluciferase アッセイにて検討したが、予想される結果が得られなかった。
次にmicroRNA200 family の既知のターゲットタンパクであるZEB1が我々のEMT実験系においてどのような動きをしているかを確認した。まず、TGFbeta1投与後経時的に胆管細胞株のタンパクを回収し、Western blot法にてZEB1タンパクの発現量を測定した。結果：TGFbeta1投与　48-72時間後において、ZEB1タンパクの発現量が低下していることが確認された。これはTGFbeta1/microRNA200 familyのシグナルにより、ZEB1の発現量がコントロールされている可能性を示唆している。

Research Products

• [Journal Article] Dysregulated microRNAs in progression of hepatocellular carcinoma: A systematic review. (2015)
  • Author(s): Mizuguchi Y, Takizawa T, Yoshida H, Uchida E.
  • Journal Title: Hepatol Res. Volume: NA Issue: 5 Pages: 391-406
  • DOI: 10.1111/hepr.12606
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Host cellular microRNA involvement in the control of hepatitis B virus gene expression and replication. (2015)
  • Author(s): Mizuguchi Y, Takizawa T, Uchida E.
  • Journal Title: World J Hepatol. Volume: 7(4) Issue: 4 Pages: 696-702
  • DOI: 10.4254/wjh.v7.i4.696
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Breast tumor kinase/protein tyrosine kinase 6 (Brk/PTK6) activity in normal and neoplastic biliary epithelia. (2015)
  • Author(s): Mizuguchi Y, Specht S, Isse K, Sasatomi E, Lunz JG 3rd, Takizawa T, Demetris AJ.
  • Journal Title: J Hepatol. Volume: 63(2) Issue: 2 Pages: 399-407
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2015.02.047
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research