| Project/Area Number |
16022229
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Review Section |
Biological Sciences
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
高橋 雅英 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40183446)
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| Project Period (FY) |
2004
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2004)
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| Budget Amount *help |
¥6,400,000 (Direct Cost: ¥6,400,000)
Fiscal Year 2004: ¥6,400,000 (Direct Cost: ¥6,400,000)
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| Keywords | Akt / アクチン / 細胞運動 / siRNA |
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| Research Abstract |
Aktはセリン、スレオニンキナーゼであり、受容体型チロシンキナーゼの下流のシグナル伝達因子として、細胞増殖、生存などに重要な役割を果たしていることが明らかになっている。Aktは原癌遺伝子の一種であり、その恒常的な活性化は細胞の癌化と密接に関わっていることが多くの例で示されている。Aktシグナル伝達経路の役割をさらに解明する目的で、yeast two hybrid法を用いてAkt結合蛋白質の同定を行った。その結果、AktのC末端領域と結合するクローンを同定し、全長cDNAのクローニングに成功した。アミノ酸配列の解析では既知の機能ドメインはなく、全く新規の分子であり、ノーザンブロット法により本遺伝子は、どの臓器にもubiquitousに発現していることが判明した。C末端領域にAktによってリン酸化されるコンセンサス配列が存在し、in vitro kinase assayやEGF刺激により活性化されたAktによってリン酸化されることから、Aktの新規基質である可能性が示唆された。作製した抗体で細胞内局在を検討したところ、アクチン細胞骨格系と共局在すると同時に、特に移動する細胞の先端部で活性化Aktと共局在していた。さらにBoyden chamberを用いたmigration assayを行った結果、C末端領域の過剰発現あるいはsiRNA存在下で、細胞の運動、接着が阻害されることから、細胞の移動、接着あるいは浸潤を制御している可能性が示唆された。
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