生体膜マイクロドメイン制御におけるプラスマローゲンの機能解明

• Project/Area Number: 16044235
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 本庄 雅則 九州大学, 大学院システム生命科学府, 特任助手 (90372747)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤木 幸夫 九州大学, 理学研究院・生物科学部門, 教授 (70261237)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥6,500,000); Fiscal Year 2005: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2004: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
• Keywords: 生体膜 / マイクロドメイン / プラスマローゲン

Research Abstract

プラスマローゲンのマクロドメインにおける機能解明
今年度新たにプラスマローゲン合成酵素単独欠損変異CHO細胞を分離し、その相補遺伝子の同定をおこなうとともに、CHO細胞の当酵素の塩基配列を決定した。さらに、当変異細胞において、当蛋白質のmRNAの著減が原因であることも明らかにした。また、当変異細胞と野性型細胞におけるマイクロドメインの比較から、プラスマローゲンはマイクロドメインの構成脂質、構成蛋白質において有意な差が観察されず、プラスマローゲンはマイクロドメインの構造維持には必要が無い事を明らかにした。次に、当変異細胞において、マイクロドメインの標識蛋白質であるモデルGPI結合型蛋白質の細胞内局在を観察したところ、野性型細胞に比べて、リサイクリングエンドソームにより局在していた。さらにモデルGPI結合型蛋白質が局在しているリサイクリングエンドソームでは細胞骨格系の蛋白質が観察された。以上の結果はGPI結合型蛋白質のリサイクリングエンドソームから細胞膜への再輸送過程がプラスマローゲンによって制御されていることを示唆している。また、プラスマローゲン合成の最終段階である小胞体から細胞膜に輸送されたプラスマローゲンの定量法を新たに確立した。さらに、いまだ不明な点が多い脂質の細胞内輸送のモデルとして、プラスマローゲンの細胞内輸送経路を検証し、プラスマローゲンの細胞膜への輸送は、小胞体からの分泌経路を阻害する薬剤に非感受性な輸送経路によって輸送されていることを明らかにした。