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組織幹細胞を用いた核移殖クローンマウスの作成と再プログラム化の解析

Research Project

Project/Area Number 16045219
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionThe Institute of Physical and Chemical Research

Principal Investigator

三好 浩之  独立行政法人理化学研究所, 生体情報統合技術開発チーム, サブチームリーダー (70219830)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 井上 貴美子  独立行政法人理化学研究所, 遺伝工学基盤技術室, 研究員 (70360500)
Project Period (FY) 2004 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥6,000,000 (Direct Cost: ¥6,000,000)
Fiscal Year 2005: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 2004: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Keywords核移植 / クローン / 再プログラム化 / 幹細胞
Research Abstract

体細胞核移植クローン技術は、医療や畜産など多岐にわたる分野での応用が期待されている。しかしながら、体細胞クローン動物の産出率が極めて低いことやクローン動物に生じる様々な異常が大きな問題となっている。これらの問題を解決するためには、再プログラム化のメカニズムを明らかにし、正確でかつ効率のよい再プログラム化を行うための技術開発が必要である。これまでのところ、ES細胞を核ドナーとしたクローンの作出効率は他の体細胞よりも高いことから、未分化な細胞の核は終末分化した細胞よりも再プログラム化され易いのではないかということが示唆されている。そこで本研究では、マウスの組織幹細胞を核ドナーとしたクローン胚あるいは個体を作出し、再プログラム化能力の評価を行った。まず、成体マウスの骨髄より単離した造血幹細胞を核ドナーとしたクローン胚を作出し、卵丘細胞の場合と比較した。造血幹細胞は2cellへの発生率は卵丘細胞と同程度に高かったが(約90%)、これは造血幹細胞の細胞周期がG0であることによると考えられる。一方、胚盤胞への発生率は非常に低く(6% vs 46%)、クローン産仔の産出率はわずか0-0.7%であった。造血幹細胞クローン胚では、接合体遺伝子の転写活性化および造血幹細胞に特異的な遺伝子の転写不活化は確認されたが、Hdac1など胚発生に重要ないくつかの遺伝子が活性化されていないことが判明した。また、神経幹細胞を核ドナーとしたクローン産仔の産出率は1.6%で、卵丘細胞と同程度であった。間葉系幹細胞の場合には、4cellへの発生率が非常に低くクローン産仔は得られなかった。これは、間葉系幹細胞を樹立する過程で起った染色体異常が原因であると考えられる。以上の結果より、組織幹細胞は多分化能を持つ未分化な細胞であるが、その再プログラム化能力は予想に反して低いことが明らかとなった。

Report

(2 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2006 2005 2004

All Journal Article (7 results)

  • [Journal Article] Inefficient reprogramming of the hematopoietic stem cell genome following nuclear transfer.2006

    • Author(s)
      Inoue, K.
    • Journal Title

      J.Cell Sci. 119(印刷中)

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Generation of cloned mice by direct nuclear transfer from natural killer T cells.2005

    • Author(s)
      Inoue, K.
    • Journal Title

      Curr.Biol. 15

      Pages: 1114-1118

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] 割球分断クローン、受精卵クローン、体細胞クローンの相違について2005

    • Author(s)
      井上貴美子
    • Journal Title

      綜合臨牀 54

      Pages: 24-29

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Cytoplasmic asters are required for progression past the first cell cycle in cloned mouse embryos.2004

    • Author(s)
      Miki, H.
    • Journal Title

      Biol.Reprod. 71

      Pages: 2022-2023

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Tissue-specific distribution of donor mitochondrial DNA in cloned mice produced by somatic cell nuclear transfer.2004

    • Author(s)
      Inoue, K
    • Journal Title

      Genesis 39

      Pages: 79-83

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] 造血幹細胞の可塑性2004

    • Author(s)
      三好浩之
    • Journal Title

      実験医学 22

      Pages: 6-11

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] 核移植技術〜マウス体細胞クローン胚作製法2004

    • Author(s)
      井上貴美子
    • Journal Title

      実験医学別冊 クロマチン・染色体実験プロトコール

      Pages: 213-223

    • Related Report
      2004 Annual Research Report

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Published: 2004-04-01   Modified: 2018-03-28  

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