• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

細胞内pHの日周変動を測定するプローブの開発

Research Project

Project/Area Number 16659063
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Environmental physiology (including Physical medicine and Nutritional physiology)
Research InstitutionNational Institute of Advanced Industrial Science and Technology

Principal Investigator

近江谷 克裕  独立行政法人産業技術総合研究所, セルエンジニアリング研究部門, 研究グループ長 (20223951)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中島 芳浩  独立行政法人産業技術総合研究所, セルエンジニアリング研究部門, 研究員 (10291080)
Project Period (FY) 2004 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Keywords生物発光 / ルシフェラーゼ / ルシフェリン / 細胞機能解析 / 細胞内pH
Research Abstract

地球上の多くの生物は昼夜に連動した24時間周期で活動する。この周期性を支える体内時計に関し分子→細胞→組織→個体のあらゆる階層で研究が盛んに行われている。よって体内時計を理解するための基盤技術の構築は重要な研究開発要素である。本研究では、核内で変動する時計遺伝子群が細胞内生理をどのように制御し体内時計が変動するか?或いは細胞内生理の変化がどのように体内時計遺伝子を制御するか?が重要であると考え、これまで充分に考察されていない体内時計の指標の一つである細胞内pH変動に着目した。そこで、pH変動を生きた哺乳類細胞においてモニタリングできるホタルルシフェラーゼ分子プローブの構築及び、本システムを用いた細胞内pH日周変動測定を目的とした。これまでに細胞内pH変動をモニタリングできるホタルルシフェラーゼ分子プローブとしてホタルルシフェラーゼ変異体を哺乳類細胞用に最適化を行い、pH8-7、7-6で発光色が変化する変異体を作成できた。本年度は、細胞内のオルガネラレベルでのpH変動をモニターするため、ホタルルシフェラーゼ変異体を細胞内オルガネラに局在化できるシグナル配列について検討した。細胞膜、細胞質、ミトコンドリア、ER及びペルオキシゾームシグナル配列を導入したルシフェラーゼ変異体を作成、発光活性が20-80%に変動すること、及び、シグナル配列に従って細胞内局在が変化することを明らかにした。今後、細胞内オルガネラレベルでpH変動がモニターできるか検討する予定である。

Report

(2 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2006 2005

All Journal Article (5 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] 遺伝子発現リアルタイム解析への発光イメージングの応用2006

    • Author(s)
      中島芳浩, 近江谷克裕
    • Journal Title

      バイオテクノロジージャーナル 3

      Pages: 230-232

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] A multicolor luciferase assay system, one-step monitoring of multiple gene expressions with a single substrate.2005

    • Author(s)
      Nakajima Y, et al.
    • Journal Title

      Biotechniques 38

      Pages: 891-894

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Basic and Applied Aspects of Color Tuning of Bioluminescence Systems.2005

    • Author(s)
      Ohmiya Y
    • Journal Title

      Jpn.J.Appl.Phys. 44

      Pages: 6368-6379

    • NAID

      130004766300

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Firefly luciferase exhibits bimodal action depending on the luciferin chirality.2005

    • Author(s)
      Nakamura M, et al.
    • Journal Title

      Biochem Biophys Res Commun 331

      Pages: 471-475

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] 三色発光ルシフェラーゼを用いた転写活性同時測定法2005

    • Author(s)
      中島芳浩, 菅田和法, 近江谷克裕
    • Journal Title

      バイオテクノロジージャーナル 7

      Pages: 453-455

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Book] バイオ・ケミルミネセンスハンドブック2006

    • Author(s)
      今井一洋, 近江谷克裕
    • Total Pages
      233
    • Publisher
      丸善
    • Related Report
      2005 Annual Research Report

URL: 

Published: 2004-04-01   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi