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肝細胞期熱帯熱マラリア原虫の培養系の確立

Research Project

Project/Area Number 16659112
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Parasitology (including Sanitary zoology)
Research InstitutionEhime University

Principal Investigator

鳥居 本美  愛媛大学, 医学部, 教授 (20164072)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 金子 修  愛媛大学, 医学部, 助教授 (50325370)
Project Period (FY) 2004 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Fiscal Year 2004: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywords感染症 / 寄生虫 / 熱帯病 / 熱帯熱マラリア原虫 / 肝細胞期原虫 / 緑色蛍光蛋白質
Research Abstract

本研究では、肝細胞期熱帯熱マラリア原虫で発現量の多い遺伝子産物のプロモーター領域を用いて緑色蛍光タンパク質(GFP)で標識した熱帯熱マラリア原虫を作成し、肝細胞期原虫の簡便な検出方法を構築することを最初の目的とし、さらに、この方法を用いてマラリア原虫の肝細胞への感染率の定量化を行うとともに、感染効率のよい培養条件を検討することで、未確立の肝細胞期熱帯熱マラリア原虫の培養系の確立を目指した。
初年度は、肝細胞に感染するスポロゾイト期を形成することを実験的に確認した2種類の熱帯熱マラリア原虫株に対して遺伝子導入を行い、Elongation Factor 1(EF1)のプロモーターからGFPおよびLuciferaseを発現しているGFP安定発現熱帯熱マラリア原虫およびLuciferase安定発現熱帯熱マラリア原虫を作成し、これらのマラリア原虫が、赤血球期においてもGFPおよびLuciferaseを発現していることを確認した。昨年度は、これらのGFP安定発現熱帯熱マラリア原虫ゲノムへの発現カセットの組み込みを図ったが、6ヶ月以上にわたり培養を継続しているにもかかわらず、現在のところ、組み込みはみられない。そこで、最近、新しく開発されたpiggyBacトランスポゾンの原理を利用した迅速にゲノムへの組み込みができる遺伝子導入法に方法を変更し、あらたにプラスミドを構築し2種類の熱帯熱マラリア原虫に遺伝子導入を行った。さらにEF1に加え、肝細胞期原虫に発現するHeat Shock ProteinのプロモーターからGFPおよびLuciferaseを発現するコンストラクトを新たに作成した。これらのコンストラクトの薬剤選択マーカーは、最終的に薬剤スクリーニングにも使用することを考慮して、最初のコンストラクト(human DHFR)とは異なるもの(BSD)を用いている。

Report

(2 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2006 2005 2004

All Journal Article (9 results)

  • [Journal Article] 2-Cys Peroxiredoxin TPx-1 is involved in gametocyte development in Plasmodium berghei.2006

    • Author(s)
      Yano K et al.
    • Journal Title

      Molecular and Biochemical Parasitology (in press)

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Apical expression of three RhopH1/Clag proteins as components of the Plasmodium falciparum RhopH complex2005

    • Author(s)
      Kaneko O et al.
    • Journal Title

      Molecular and Biochemical Parasitology 143

      Pages: 20-28

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] SURFIN is a polymorphic antigen expressed on Plasmodium falciparum merozoites and infected erythrocytes2005

    • Author(s)
      Winter G et al.
    • Journal Title

      Journal of Experimental Medicine 201

      Pages: 1853-1863

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Nasal immunization with a malaria transmission-blocking vaccine candidate Pfs25 induces complete protective immunity in mice against field-isolated Plasmodium falciparum2005

    • Author(s)
      Arakawa T et al.
    • Journal Title

      Infection and Immunity 73

      Pages: 7375-7380

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Erythrocyte surface glycosylphosphatidyl inositol anchored receptor for the malaria parasite2005

    • Author(s)
      Rungruang T et al.
    • Journal Title

      Mol.Biochem.Parasitol. 140・1

      Pages: 13-21

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Potent immunogenicity of DNA vaccines encoding Plasmodium vivax transmission-blocking vaccine candidates Pvs25 and Pvs28-evaluation of homologous and heterologous antigen-delivery prime-boost strategy.2004

    • Author(s)
      Kongkasuriyachai D et al.
    • Journal Title

      Vaccine 22・23-24

      Pages: 3205-3213

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] A rapid genotyping method for the vivax malaria transmission-blocking vaccine candidates, Pvs25 and Pvs28.2004

    • Author(s)
      Tsuboi T et al.
    • Journal Title

      Parasitol Int 53・3

      Pages: 211-216

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Plasmoduim ookinate-secreted proteins secreted through a common micronemal pathway are targets of blocking malaria transmission.2004

    • Author(s)
      Li F et al.
    • Journal Title

      J Biol Chem 279・25

      Pages: 26635-26644

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Antibodies against MAEBL ligand domains M1 and M2 inhibit sporozoite development in vitro.2004

    • Author(s)
      Preiser P et al.
    • Journal Title

      Infect Immun 72・6

      Pages: 3604-3608

    • Related Report
      2004 Annual Research Report

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Published: 2004-04-01   Modified: 2016-04-21  

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