ファージ由来溶菌酵素を利用するメチシリン耐性黄色ブドウ球菌院内感染制御

• Project/Area Number: 16659278
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Kochi University
• Principal Investigator: 藤枝 幹也 (2005) 高知大学, 医学部, 助教授 (60209020); 遠藤 文香 (2004) 高知大学, 医学部, 助手 (70363273)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松崎 茂展 高知大学, 医学部, 助教授 (00190439) ; 脇口 宏 高知大学, 医学部, 教授 (10116519) ; 今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592) ; 藤枝 幹也 高知大学, 医学部, 助教授 (60209020)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2005: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2004: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
• Keywords: 感染症 / 黄色ブドウ球菌 / バクテリオファージ / 溶菌酵素 / 軟膏剤 / 抗生物質非依存療法

Research Abstract

I.黄色ブドウ球菌ファージ由来溶菌酵素投与の安全性の検討
(1)過剰投与の影響:ファージ由来溶菌酵素500Uは、マウス鼻腔からのMRSA除菌およびMRSA全身感染マウスの救命に十分な量であることを確認した。更に、腹腔内に過剰量の溶菌酵素1000U,2000U,4000Uを単独で投与し、接種直後から3ヶ月後まで生存率および全身状態を検討した。その結果全てのマウスにおいて生存率および全身状態に何ら影響は認められなかった。またマウス鼻腔内に溶菌酵素500U単独滴下した場合も、マウスの全身状態への影響は認められなかった。
(2)反復投与の影響:マウス腹腔に500U溶菌酵素を10日毎に3回投与を行なった。3回目投与においても、全身状態に何ら影響はなくアナフィラキシー等は観察されなかった。
(3)抗溶菌酵素抗体の産生および溶菌活性への影響の検討:上記3回溶菌酵素投与マウスの血清を採取し、Western blotting法及びELISA法により抗溶菌酵素抗体の産生を確認した。抗溶菌酵素抗血清と溶菌酵素を混合後37℃、1時間保温し溶菌活性への影響を検討した。しかし、抗体の溶菌活性への影響はほとんど認められなかった。
II.溶菌酵素調剤法の検討:
ヒト鼻腔、皮膚への溶菌酵素投与用薬剤開発を目指し、粉末剤および軟膏剤としての製剤法の可能性を検討した。
(1)精製酵素溶液を凍結乾燥して粉末状にし、10日後生食等で再度溶液化し溶菌活性を検討した。その結果粉末状でも活性を保持していることが分かった。
(2)溶菌酵素溶液を水溶性軟膏基剤と混合し、4℃で10日間保存し溶菌活性を検討した結果軟膏基剤と混合した状態でも、溶菌活性は安定に保持されることが明らかとなった。
III.結論
ファージ由来溶菌酵素は、安全性の高い薬剤としてMRSA除菌等に使用できる可能性が強く示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Eradication of Epstein-Barr virus episome and associated inhibition of infected tumor cell growth by adenovirus vector-mediated transduction of dominant-negative EBNA1 (2005)
  • Author(s): Nasimuzzaman, Md, Kuroda M, Dohno S, Yamamoto T, Iwatsuki K, Matsuzaki S, Rashel M, Kumita W, Mizuguchi H, Hayakawa T, Nakamura H, Taguch T, Wakiguchi H, Imai S.
  • Journal Title: Molecular Therapy 11(4) Pages: 578-590
• [Journal Article] Bacteriophage therapy-A short review (2005)
  • Author(s): Matsuzaki M, Rashel M, Kuroda M, Hoshuba H, Ujihara T, Akechi K, Uchiyama J, Sakurai S, Imai S.
  • Journal Title: Recent Research of Developments in Virology 7 Pages: 1-11
• [Journal Article] Bacteriophage therapy - A revitalized therapy against bacterial infectious diseases (2005)
  • Author(s): Matsuzaki S, Rashel M, Uchiyama J, Sakurai S, Ujihara T, Kuroda M, Ikeuchi M, Tani T, Fujieda M, Wakiguchi H, Imai S.
  • Journal Title: Journal of Infections and Chemotherapy 11 Pages: 211-219
  • NAID: 10016776133
• [Journal Article] Epitope analysis of myeloperoxidase-specific antineutrophil cytoplasmic atoantibodies(MPO-ANCA) in childhood onset Graves' disease treated with propylthiouracil. (2005)
  • Author(s): Fujieda M, Suzuki K, Saito H, Hattori M, Wada N, Tsuchiya M, Okamoto N, Murata T, Matsudaira M, Shimizu M, Ohata K, Naruse K, Sugihara S, Wakiguchi H
  • Journal Title: Clinical Nephorology 63 Pages: 437-445
• [Journal Article] Primary cytomegalovirus infection as a common cause of wheezing in infants. (2005)
  • Author(s): Morisawa Y, Maeda A, Sato T, Hisakawa H, Fujieda M, Wakiguchi H.
  • Journal Title: J Allergy Clin Immunol 115(2)
• [Journal Article] Infantile eczema at one month of agels associated with cord blood eosinophilia and subsequent development of atopic dermatitis and wheezing illnes until two years of age. (2005)
  • Author(s): Matsumoto K, Shimanouchi Y, Kawakubo K, Oishi N, Wakiguchi H, Futamura K, Saito H.
  • Journal Title: Int Arch Allergy Immunol, 137(suppl 1) Pages: 69-76
• [Journal Article] Bacteriophage Therapy. (2005)
  • Author(s): Matsuzaki S, et al.
  • Journal Title: Recent Res Develop Virol (In press)
• [Journal Article] Bacteriophage therapy - A revitalized therapy against bacterial infectious diseases. (2005)
  • Author(s): Rashel M, et al.
  • Journal Title: J Infect Chemother (In press)
• [Journal Article] バクテリオファージ療法の可能性と課題 (2004)
  • Author(s): 松崎茂展, 他
  • Journal Title: 医薬ジャーナル 40(9) Pages: 2454-2459
  • NAID: 40006401609
• [Journal Article] 難治性細菌感染症に対するバクテリオファージ療法-MRSAを中心に (2004)
  • Author(s): 今井章介, 松崎茂展
  • Journal Title: 高知市医師会医学雑誌 9(1) Pages: 32-43
• [Book] 小児の発疹性疾患.今日の治療指針 2005 (2005)
  • Author(s): 脇口 宏
  • Total Pages: 3
  • Publisher: 医学書院
• [Book] こどもの感染症ハンドブック(脇口 宏編)、第2版、各種小児感染症.神経系疾患.「化膿性髄膜炎」、「破傷風」(分担執筆) (2004)
  • Author(s): 遠藤文香
  • Total Pages: 9
  • Publisher: 医学書院(東京)
• [Book] こどもの感染症ハンドブック(脇口 宏編)、第2版、「21世紀の感染症治療:バクテリオファージ療法」(分担執筆) (2004)
  • Author(s): 今井章介, 松崎茂展
  • Total Pages: 10
  • Publisher: 医学書院(東京)