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糸状菌におけるフェニルアラニンアナログが引き起こすチューブリン関与の形態異常

Research Project

Project/Area Number 16780062
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied microbiology
Research InstitutionOsaka City University

Principal Investigator

藤田 憲一  大阪市立大学, 大学院理学研究科, 助教授 (10285281)

Project Period (FY) 2004 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Fiscal Year 2005: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Keywords出芽酵母 / 偽菌糸形成 / 細胞骨格 / チューブリン / イソアミルアルコール / 微小管 / L-2,5-dihydrophenylalanine / Aspergillus nidulans / microtubule / tubulin / morphological change / Saccharomyces cerevisiae
Research Abstract

出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeは、糸状菌とは異なり、通常の培養条件下では酵母状の丸い細胞形態を示すが、イソアミルアルコール(IAA)存在下で、細胞が伸張し出芽が形成された後も娘細胞の分離が遅れて伸長し続け、偽菌糸型の形態を示すことが知られている。今回、細胞の形態が偽菌糸に変化するときに起こっていると予想される細胞骨格分子(チューブリンおよびアクチン)への影響について調べた。まず、ウェスタン解析の結果、IAAによる偽菌糸形成時にα-およびβ-チューブリン量が相対的に低下し、アクチンは低下しないことが明らかになった。加えてFACS解析の結果、アクチン量は細胞容積の増大と共に比例するが、チューブリンのそれは相対的に減少していくことがわかった。しかし顕微鏡下では紡錘体の消失は観察されず、染色体分配は正常に進行しているものとしていないものの両方が観察された。さらにチューブリン消失の原因がmRNAへの転写阻害によるものかをRT-PCR法によって調べたが、mRNAの発現量にコントロールとの大きな差違は認められなかった。また免疫沈降法によりα-チューブリンを精製したが、ユビキチン化されたものは検出されなかった。従って、現在のところ、相対チューブリン量の低下の原因は不明である。しかしながら、フェニルアラニン誘導体以外にも糸状菌の形態異常とチューブリン量の低下に相関が見られる化合物が見いだされ、それはIAAであることがわかった。

Report

(2 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2004

All Journal Article (2 results)

  • [Journal Article] 新しい微小管阻害剤を発見-チューブリン消失を伴うフェニルアラニン誘導体とは-2004

    • Author(s)
      藤田 憲一
    • Journal Title

      化学と生物 42巻12号

      Pages: 782-784

    • NAID

      10016520333

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Screening for microtubule-disrupting antifungal agents by using a mitotic-arrest mutant of Aspergillus nidulans and novel action of phenylalanine derivatives accompanying tubulin loss.2004

    • Author(s)
      Kiso, T., Fujita, K., Ping, X., Tanaka, T., Taniguchi, M.
    • Journal Title

      Antimicrobial Agents and Chemotherapy 48

      Pages: 1739-1748

    • Related Report
      2004 Annual Research Report

URL: 

Published: 2004-04-01   Modified: 2016-04-21  

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