リポ蛋白代謝及び動脈硬化発生におけるアポ蛋白AIIの役割

• Project/Area Number: 16790181
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pathological medical chemistry
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 孫 慧君 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 助手 (00361329)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 範 江林 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 助教授 (60272192)
• Project Period (FY): 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2004: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: トランスジェニック / リポ蛋白 / アポ蛋白 / 動脈硬化 / 脂質代謝 / 高脂血症 / 動物モデル / 遺伝子導入

Research Abstract

アポ蛋白A-II(アポAII)は高比重リポ蛋白(HDL)の約25%を占める主要アポ蛋白であり、主に肝臓で合成される。しかし、アポAIIの生理機能および動脈硬化との関係はまだ解明されてない。本研究では、リポ蛋白代謝および動脈硬化の発生におけるアポAIIの直接的役割、病理的意義を明らかするために、ヒトアポAII遺伝子は本来アポAIIを有していないウサギに導入することによって、アポAIIを発現するトランスジェニック(Tg)ウサギの作製を目的とした。本年度では肝臓で特異的に発現するアポEプロモーターを有する発現ベクターとヒトアポAII c DNAとを構築した。それを用いて、876個のウサギ受精卵に注入し、28羽の仮親ウサギに移植した。得られた59羽の仔ウサギのうち、4羽がポジであった。ウサギの血清をSDS-PAGEで分析したところ、2羽のウサギはヒトアポAII蛋白を発現していることが確認された。さらに、ELISA法にて血清のアポAIIの濃度を測定した。トランスジェニックウサギのアポAIIの濃度は〜5mg/dlでヒトより低いことがわかりました。また、超遠心法によりヒトアポAIIはウサギのHDLに存在していることも確認されています。現在これらのTgウサギを用いて、コレステロール食投与実験によりアポAIIの動脈硬化の発生・進展における役割を検討している。今後、アポAII発現レベルの高いFounderウサギの作製を計画している。