ヒト組織感染モデルによるヒト免疫不全ウイルス間の相互作用からみた病態の解析

• Project/Area Number: 16790281
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Virology
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 伊藤 嘉規 愛知県がんセンター(研究所), 腫瘍免疫学部, 主任研究員 (20373491)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000); Fiscal Year 2005: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2004: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
• Keywords: ヒト免疫不全ウイルス / 共感染 / ヒトリンパ組織モデル / リアルタイムPCR法 / 定量PCR法

Research Abstract

1.HIV-1感染症を引き起こすウイルスのサブタイプである、R5指向性HIV-1(R5 HIV-1)、X4指向性HIV-1(X4 HIV-1)およびR5X4両指向性HIV-1(R5X4 HIV-1)の3種の相互作用を検討するためのモデルについて検討した。医学的理由で摘出された健常扁桃組織を小片に切り分けて作成したヒトリンパ組織モデルにおいて、それぞれのプロトタイプとして、増殖曲線が同様で、均一なウイルスストックが得られやすいものとして、SF162(R5 HIV-1)、LAV.04(X4 HIV-1)および89.6(R5X4 HIV-1)を選択した。さらに、これらの組み合わせにおいて、それぞれのウイルスを他の2つのウイルス存在下で、正確に定量できるようなプライマーの設定を試みた。gp120遺伝子内の部位に設定したプライマーにより、こうしたことが可能なリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。上記3種のウイルスを共感染させた場合は、R5 HIV-1の増殖は抑制され、X4 HIVとRSX4 HIV-1の増殖は競合阻害を示した。
2.HIV-1およびHIV-2の相互作用については、SF162(R5 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせ、およびLAV.04(X4 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせにおいて共感染モデルおよびリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。この場合のプライマーは、HIV-1についてはvpu遺伝子(HIV-2にはない)領域に設定し、HIV-2についてはvpr遺伝子(HIV-1とHIV-2で相同性が低い)領域に設定した。上記2組の共感染実験の結果、HIV-2はR5 HIV-1に対して、X4 HIV-1はHIV-2に対して増殖を抑制した。この現象を説明できる因子について解析をすすめている。