時計遺伝子および概日リズムをもった核受容体の脂肪細胞における役割の解明

• Project/Area Number: 16790523
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Endocrinology
• Research Institution: Shinshu University
• Principal Investigator: 柿澤 供子 信州大学, 医学部附属病院, 助手 (80362127)
• Project Period (FY): 2004 – 2006
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2006)
• Budget Amount: ¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000); Fiscal Year 2006: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2005: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2004: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
• Keywords: 概日リズム / 時計遺伝子 / 核受容体 / PPARδ / SHP / Clock / BMAL1 / 脂肪細胞 / CLOCK / BMAL

Research Abstract

脂肪細胞において概日リズム発現を認めた因子についてのプロモーター解析。
昨年度までに検討した脂肪細胞に発現する遺伝子(AP-1、c-fos、c-jun、c-myc、fra-1、C/EBPα、C/EBPδ、PPARγ、PPARα、PPARδ、SHP, RORs、RAR、LXRα、ERRs、PGC1、SREBP1など)のなかで、real time quantitative RT-PCR法にて概日リズム発現を確認した因子のうち、核受容体PPARδ、SHPについてそのプロモーター領域をクローニングし解析した。E-boxの有無やCLOCK/BMAL1による制御の有無、RevREの有無について、一過性発現系によるレポーターアッセイを用いて検討したところ、PPARδ、SHPについては、CLOCK/BMAL1による転写活性化が明らかとなった。またゲルシフトアッセイにて、CLOCK/BMALのプロモーターへの直接結合が確認できた。興味深いことに、SHPについては、その転写活性化因子LRH-1とCKOCK/BMALの間に直接の相互作用が存在することが明らかとなった。以上の結果は、Biochem Biophys Res Commun. 353:895-901に発表した。また、PPARδについては、そのプロモーターはCLOCK/BMAL1による制御のみでなく、Rev-erbα/RORによる制御も同時に受けていた。以上の結果については平成19年6月に開催される第80回内分泌学会学術総会にて発表予定である。

Research Products

• [Journal Article] Synergistic regulation of the mouse orphan nuclear receptor SHP gene promoter by CLOCK-BMAL1 and LRH-1. (2007)
  • Author(s): Oiwa A, Kakizawa T, Miyamoto T, 他5名
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. 353 Pages: 895-901
• [Journal Article] Two differentially active alternative promoters control the expression of the zebrafish orphan nuclear receptor gene Rev-erb alpha (2007)
  • Author(s): Kakizawa T, Nishio S, Triqueneaux G 他4名
  • Journal Title: J Mol Endocrinol 38 Pages: 553-566
• [Journal Article] Inhibition of LXRalpha signaling by vitamin D receptor : possible role of VDR in bile acid synthesis. (2006)
  • Author(s): Jiang W, Miyamoto T, Kakizawa T, 他5名
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. 351 Pages: 176-184
• [Journal Article] The orphan receptor Rev-erbalpha gene is a target of the circaircadian clock pacemaker (2004)
  • Author(s): Triqueneaux G, Thenot S, Kakizawa T, Antoch MP, Safi R, Takahashi J, et al.
  • Journal Title: J.Mol.Endocrinology 33 Pages: 585-608
• [Journal Article] Expression of thyroid hormone receptor alpha 3T3-L adipocytes ; triiodothyronine increases the expression of lipogenic enzyme and triglyceride accumulation (2004)
  • Author(s): Jiang, W, Miyamoto T, Kakizawa T, Sakuma T, Nishio S, et al.
  • Journal Title: J.Endocrinol. 182 Pages: 295-302