HBs抗原粒子をベクターとしたヒト肝細胞に対する遺伝子治療の開発

• Project/Area Number: 16790785
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Tokyo Dental College (2005); Keio University (2004)
• Principal Investigator: 宮田 量平 東京歯科大学, 歯学部, 助手 (20327571)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2005: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2004: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
• Keywords: L粒子 / HBs抗原粒子 / HGF

Research Abstract

ヒト肝細胞癌に対して特異的に抗腫瘍効果を持つことのin vitroでの確認
正常ヒト肝細胞株と肝細胞癌株(HepG2,HepC3A,NuE)にHGF封入HBs抗原粒子を導入し,HGF,EGFP,FLAGの発現をELISA, Western blot,蛍光顕微鏡を用いて解析する.
対照として大腸癌株(WiDr,HT29)を使用しHGF封入HBs抗原粒子を導入し,HGFの活性部位の発現をELISA, Western blot等で解析する
HGFの抗腫瘍効果-肝再生の判定はMTT assayで行う.
HepC3Aでは抗腫瘍効果を認めたが対照の大腸癌株(WiDr)では抗腫瘍効果を認めなかった.
ヒト肝細胞癌に対して特異的に抗腫瘍効果を持つことのin vivoでの確認
肝細胞癌株(HepG2,HepC3A,NuE),大腸癌株(WiDr,HT29)をそれぞれマウスの皮下に移植し担癌マウスを作製.対照として正常ヒト肝組織移植ヌードマウスを作製.
HGFを封入したL粒子をマウスの尾静脈から静注し,経時的に腫瘍径を測定やHE染色で細胞形態やApoptotic Indexを検討し抗腫瘍効果を判定する.
肝再生はBrdU Labelling IndexやCell Growth Assay, propidium iodineを用いたCell Cycle Analysisなどを用いて判定する.HGF封入L粒子は肝細胞癌株(HepG2)で腫瘍径の縮小を認めたが,対照の大腸癌株(WiDr)では抗腫瘍効果を認めなかった.