| Project/Area Number |
16790876
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Anesthesiology/Resuscitation studies
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
井上 隆弥 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00335358)
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| Project Period (FY) |
2004 – 2005
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2005)
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| Budget Amount *help |
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
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| Keywords | 神経因性疼痛 / 情動行動異常 / 海馬 / 遺伝子発現 / DNAチップ |
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| Research Abstract |
16年度
行動科学的手法による異常行動検出後、神経因性疼痛モデル動物および対照動物より海馬を取りだし、抽出したRNAの分析を網羅的に行うため、DNAチップを用いて解析した。
17年度
1.行動学的手法による疼痛および抑うつ、不安行動検出
神経因性疼痛モデルには、マウスの左第5腰神経を結紮するChungモデルを用いた。Chungモデル群およびその対象(神経非損傷)群をそれぞれ8匹ずつ作成し、温熱刺激、機械刺激に対する疼痛反応および情動行動の変化を観察した。
2.DNAチップ結果の解析
DNAチップ解析にはアマシャム社CodeLink(マウス用:約20,000遺伝子)を用いて委託解析した。2倍以上の発現増加もしくは、1/2以下の発現低下を示した遺伝子は約400抽出された。発現変化を示したそれら遺伝子について当モデルとの機能関連についての情報を収集し、それら遺伝子群の相互関係を検討した結果、構造上、機能上に重要な遺伝子の変化が検出された。
3.RT-PCR法を用いたDNAチップ解析の確認作業
上記1よりさらに選出した約100遺伝子について、海馬における遺伝子発現変化を確認するため、RT-PCR法を用いて2群間の発現変化を調べた。
4.海馬における限局的遺伝子発現変化を検討
さらに海馬全体ではなく、海馬の限局した遺伝子発現変化を検討するため、モデル動物および対照動物より作製した海馬凍結切片から顕微鏡下で海馬組織の一部分を正確に切り取り、上記2の作業を平行して行った。
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