ヒト精巣セミノーマ細胞株における低酸素培養とVEGF-Cに関する検討

• Project/Area Number: 16790932
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Urology
• Research Institution: Kobe University (2005); Kawasaki Medical School (2004)
• Principal Investigator: 石村 武志 神戸大学, 医学部附属病院, 医員 (60368652)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000); Fiscal Year 2005: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000); Fiscal Year 2004: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
• Keywords: VEGF-C / ヒト精巣セミノーマ / 低酸素

Research Abstract

VEGF-Cは癌のリンパ行性転移に重要であると考えられている。今回、ヒト精巣セミノーマ細胞株において、低酸素培養のVEGF-Cの発現とその発現機序に関して検討した。
細胞株はヒト精巣セミノーマ細胞株(JKT-1)を用い、低酸素培養は1%と5%O_2下で行った。遺伝子発現は半定量的なmultiplex RT-PCR法、蛋白発現はWestern blotting法、シグナル系の解析は各々inhibitorを用いて検討を行った。
5%O_2の低酸素培養ではVEGF-Cの発現の変化は認めなかったが、1%O_2の低酸素培養では16時間後より遺伝子発現の増加を認め、24時間後より蛋白発現の増加を認めた。シグナル系の検討では、低酸素培養にて高発現となるVEGF-Cの遺伝子発現は、MEK1のinhibitorであるPD098059添加では変化は認めなかったが、phophahdylinositol 3-kinase(PI3K)のinhibitorであるLY294002添加では有意に抑制された。
ヒト精巣セミノーマ細胞株において、1%O_2の低酸素培養で、リンパ行性転移に関与するとされるVEGF-Cの発現が、遺伝子・蛋白レベルともに亢進し、PI3K signaling pathwayの関与が示唆された。