| Project/Area Number |
16791301
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Orthodontic/Pediatric dentistry
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
田中 聖至 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 助手 (00350166)
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| Project Period (FY) |
2004 – 2006
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2006)
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| Budget Amount *help |
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2006: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2005: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | GTF / 齲蝕 / St.mutans / St.sobrinus / リゾチーム / St. mutans / St. sobrinus |
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| Research Abstract |
齲蝕原因菌であるSt.mutansやSt.sobrinusが産生する菌体外多糖類の合成に係るグルコシルトランスフェラーゼの阻害因子を唾液中のタンパク質に求めるという目的で実験を行い、St.sobrinus 6715株の培養液から抽出した粗GTFase活性がリゾチーム(卵白由来)存在下・で抑制を受けることを確認した。その結果を第48回歯科基礎医学会にて発表した。
しかし、
1)500μMリゾチームでGTFase活性がコントロールに比べ50%阻害されたが、リゾチーム濃度が唾液中の濃度(0.6μM)に比べ高濃度であった。
2)用いたGTFaseがGTF-I、SIの混合物であり、精製されていなかった。
3)Inhibition assayに用いたリゾチームがニワトリ由来のものであり、ヒトリゾチームと約40%アミノ酸組成が異なり立体構造に違いがあった。
4)ヒト唾液リゾチームが試薬として市販されていなかった。
という点から、リゾチームおよびGTFaseをリコンビナントプロテインとして作成する必要に迫られた。
そこで、大腸菌による生成を試みたがインサート生成後のステップで障害が生じ、本年度中にリコンビナントプロテインを得ることが不可能であった。
今後、リコンビナントプロテイン作成を効率的に行うために、また、他の唾液タンパク質とGTFaseとの相互作用の解析も視野に入れ、バキュロウィルス発現系を導入を計画している。
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